公開(公告)號
|
CN1760208A
|
公開(公告)日
|
2006.04.19
|
申請(專利)號
|
CN200410046844.6
|
申請日期
|
2004.10.15
|
專利名稱
|
一種人野生型P53融合蛋白
|
主分類號
|
C07K19/00(2006.01)I
|
分類號
|
C07K19/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I
|
分案原申請?zhí)? |
|
優(yōu)先權(quán)
|
|
申請(專利權(quán))人
|
蘇先獅
|
發(fā)明(設(shè)計)人
|
蘇先獅;龔國忠
|
地址
|
410011湖南省長沙市人民中路86號中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院肝病研究所
|
頒證日
|
|
國際申請
|
|
進入國家日期
|
|
專利代理機構(gòu)
|
湖南兆弘專利事務(wù)所
|
代理人
|
張美娟
|
國省代碼
|
湖南;43
|
主權(quán)項
|
一種人野生型P53融合蛋白,其特征在于該融合蛋白的cDNA的核苷酸序列和相應(yīng)的編碼氨基酸序列如下: gggatccggcgtcgtcagcagcgacgtaaaaagaggatggaggagccg48 GlyIleArgArgArgGlnGlnArgArgLysLysArgMetGluGluPro 151015 cagtcagatcctagcgtcgagccccctctgagtcaggaaacattttca96 GlnSerAspProSerValGluProProLeuSerGlnGluThrPheSer 202530 gacctatggaaactacttcctgaaaacaacgttctgtcccccttgccg144 AspLeuTrpLysLeuLeuProGluAsnAsnValLeuSerProLeuPro 354045 tcccaagcaatggatgatttgatgctgtccccggacgatattgaacaa192 SerGlnAlaMetAspAspLeuMetLeuSerProAspAspIleGluGln 505560 tggttcactgaagacccaggtccagatgaagctcccagaatgccagag240 TrpPheThrGluAspProGlyProAspGluAlaProArgMetProGlu 65707580 gctgctccccccgtggcccctgcaccagcagctcctacaccggcggcc288 AlaAlaProProValAlaProAlaProAlaAlaProThrProAlaAla 859095 cctgcaccagccccctcctggcccctgtcatcttctgtcccttcccag336 ProAlaProAlaProSerTrpProLeuSerSerSerValProSerGln 100105110 aaaacctaccagggcagctacggtttccgtctgggcttcttgcattct384 LysThrTyrGlnGlySerTyrGlyPheArgLeuGlyPheLeuHisSer 115120125 gggacagccaagtctgtgacttgcacgtactcccctgccctcaacaag432 GlyThrAlaLysSerValThrCysThrTyrSerProAlaLeuAsnLys 130135140 atgttttgccaactggccaagacctgccctgtgcagctgtgggttgat480 MetPheCysGlnLeuAlaLysThrCysProValGlnLeuTrpValAsp 145150155160 tccacacccccgcccggcacccgcgtccgcgccatggccatctacaag528 SerThrProProProGlyThrArgValArgAlaMetAlaIleTyrLys 165170175 cagtcacagcacatgacggaggttgtgaggcgctgcccccaccatgag576 GlnSerGlnHisMetThrGluValValArgArgCysProHisHisGlu 180185190 cgctgctcagatagcgatggtctggcccctcctcagcatcttatccga624 ArgCysSerAspSerAspGlyLeuAlaProProGlnHisLeuIleArg 195200205 gtggaaggaaatttgcgtgtggagtatttggatgacagaaacactttt672 ValGluGlyAsnLeuArgValGluTyrLeuAspAspArgAsnThrPhe 210215220 cgacatagtgtggtggtgccctatgagccgcctgaggttggctctgac720 ArgHisSerValValValProTyrGluProProGluValGlySerAsp 225230235240 tgtaccaccatccactacaactacatgtgtaacagttcctgcatgggc768 CysThrThrIleHisTyrAsnTyrMetCysAsnSerSerCysMetGly 245250255 ggcatgaaccggaggcccatcctcaccatcatcacactggaagactcc816 GlyMetAsnArgArgProIleLeuThrIleIleThrLeuGluAspSer 260265270 agtggtaatctactgggacggaacagctttgaggtgcgtgtttgtgcc864 SerGlyAsnLeuLeuGlyArgAsnSerPheGluValArgValCysAla 275280285 tgtcctgggagagaccggcgcacagaggaagagaatctccgcaagaaa912 CysProGlyAsgAspArgThgThrGluGluGluAsnLeuArgLysLys 290295300 ggggagcctcaccacgagctgcccccagggagcactaagcgagcactg960 GlyGluProHisHisGluLeuProProGlySerThrLysArgAlaLeu 305310315320 cccaacaacaccagctcctctccccagccaaagaagaaaccactggat1008 ProAsnAsnThrSerSerSerProGlnProLysLysLysProLeuAsp 325330335 ggagaatatttcacccttcagatccgtgggcgtgagcgcttcgagatg1056 GlyGluTyrPheThrLeuGlnIleArgGlyArgGluArgPheGluMet 340345350 ttccgagagctgaatgaggccttggaactcaaggatgcccaggctggg1104 PheArgGluLeuAsnGluAlaLeuGluLeuLysAspAlaGlnAlaGly 355360365 aaggagccaggggggagcagggctcactccagccacctgaagtccaaa1152 LysGluProGlyGlySerArgAlaHisSerSerHisLeuLysSerLys 370375380 aagggtcagtctacctcccgccataaaaaactcatgttcaagacagaa1200 LysGlyGlnSerThrSerArgHisLysLysLeuMetPheLysThrGlu 385390395400 gggcctgactcagactga1218 GlyProAspSerAsp--- 405
|
摘要
|
本發(fā)明涉及一種P53融合蛋白。本發(fā)明將人wtP53基因cDNA片段和蛋白傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域(PTD)融合,插入到大腸桿菌原核表達載體PGEX-3X中,得到重組表達質(zhì)粒PGEX-3X-P53,利用IPTG誘導(dǎo)產(chǎn)生wtP53融合蛋白;分子量約為53kbp,經(jīng)DNA序列測定,它由1218個核苷酸組成;經(jīng)MTT法及TUMEL法體外實驗,表明wtP53融合蛋白可明顯抑制肺癌細胞H1299和肝癌細胞HePG2的增殖,促進其調(diào)亡,本發(fā)明為應(yīng)用wtP53融合蛋白治療腫瘤提供了可靠的途徑。
|
國際公布
|
|