公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1304422C
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公開(kāi)(公告)日
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2007.03.14
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN200510060781.4
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申請(qǐng)日期
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2005.09.15
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專利名稱
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非酰胺化ω-芋螺毒素M ⅦA 及其制備方法和應(yīng)用
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主分類(lèi)號(hào)
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C07K14/435(2006.01)I
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分類(lèi)號(hào)
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C07K14/435(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I;A61P29/00(2006.01)I;A61P25/04(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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浙江大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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詹金彪;王 峰
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地址
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310027浙江省杭州市西湖區(qū)浙大路38號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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杭州求是專利事務(wù)所有限公司
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代理人
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張法高;趙杭麗
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國(guó)省代碼
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浙江;33
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主權(quán)項(xiàng)
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非酰胺化ω-芋螺毒素M VIIA,其特征是:具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列,分子量為2639,該多肽分子中Cys1與Cys16、Cys8與Cys20、Cys15與Cys25分別形成三對(duì)二硫鍵,C-端為非酰胺化Cys。
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摘要
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本發(fā)明提供非酰胺化ω-芋螺毒素M ⅦA(ω-CTX M ⅦA),是根據(jù)已知的ω-CTX M ⅦA氨基酸序列,設(shè)計(jì)并合成編碼非酰胺化ω-CTX M ⅦA的DNA片段,對(duì)表達(dá)載體pPIC9進(jìn)行Xho I/EcoR I雙酶切,經(jīng)連接構(gòu)建成重組表達(dá)質(zhì)粒pPIC9-CTX,用電穿孔法轉(zhuǎn)化畢赤酵母,經(jīng)篩選得到高產(chǎn)菌株,并由甲醇誘導(dǎo)表達(dá)。本發(fā)明在畢赤酵母中成功表達(dá)了非酰胺化的ω-CTX M ⅦA,生產(chǎn)新型的非酰胺化的ω-CTX M ⅦA,制備工藝簡(jiǎn)單穩(wěn)定,生產(chǎn)成本較低。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明具有很高的鎮(zhèn)痛活性,其鎮(zhèn)痛效力是嗎啡的900倍,可用于鎮(zhèn)痛藥物的開(kāi)發(fā)。
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國(guó)際公布
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