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非酰胺化ω-芋螺毒素MⅦA及其制備方法和應(yīng)用

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1304422C  
公開(kāi)(公告)日 2007.03.14  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200510060781.4  
申請(qǐng)日期 2005.09.15  
專利名稱 非酰胺化ω-芋螺毒素M A 及其制備方法和應(yīng)用  
主分類(lèi)號(hào) C07K14/435(2006.01)I  
分類(lèi)號(hào) C07K14/435(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I;A61P29/00(2006.01)I;A61P25/04(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 浙江大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 詹金彪;王 峰  
地址 310027浙江省杭州市西湖區(qū)浙大路38號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 杭州求是專利事務(wù)所有限公司  
代理人 張法高;趙杭麗  
國(guó)省代碼 浙江;33  
主權(quán)項(xiàng) 非酰胺化ω-芋螺毒素M VIIA,其特征是:具有SEQ ID NO:1的基酸序列,分子量為2639,該多肽分子中Cys1與Cys16、Cys8與Cys20、Cys15與Cys25分別形成三對(duì)二硫鍵,C-端為非酰胺化Cys。  
摘要 本發(fā)明提供非酰胺化ω-芋螺毒素M ⅦA(ω-CTX M ⅦA),是根據(jù)已知的ω-CTX M ⅦA氨基酸序列,設(shè)計(jì)并合成編碼非酰胺化ω-CTX M ⅦA的DNA片段,對(duì)表達(dá)載體pPIC9進(jìn)行Xho I/EcoR I雙酶切,經(jīng)連接構(gòu)建成重組表達(dá)質(zhì)粒pPIC9-CTX,用電穿孔法轉(zhuǎn)化畢赤酵母,經(jīng)篩選得到高產(chǎn)菌株,并由甲醇誘導(dǎo)表達(dá)。本發(fā)明在畢赤酵母中成功表達(dá)了非酰胺化的ω-CTX M ⅦA,生產(chǎn)新型的非酰胺化的ω-CTX M ⅦA,制備工藝簡(jiǎn)單穩(wěn)定,生產(chǎn)成本較低。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明具有很高的鎮(zhèn)痛活性,其鎮(zhèn)痛效力是嗎啡的900倍,可用于鎮(zhèn)痛藥物的開(kāi)發(fā)。  
國(guó)際公布  
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