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酒曲霉菌中蛋白水解酶的增強(qiáng)表達(dá)

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1292068C  
公開(kāi)(公告)日 2006.12.27  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN98801287.1  
申請(qǐng)日期 1998.05.01  
專利名稱 曲霉菌中蛋白水解酶的增強(qiáng)表達(dá)  
主分類號(hào) C12N15/31(2006.01)I  
分類號(hào) C12N15/31(2006.01)I;C12N1/15(2006.01)I;C07K14/38(2006.01)I;C12N9/62(2006.01)I;A23J3/16(2006.01)I;A23J3/18(2006.01)I;C12P21/06(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1997.7.5 EP 97111378.2  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 巢制品公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 P·范登布勒克;M·阿福爾特  
地址 瑞士沃韋  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng) 1998-05-01 PCT/EP1998/002785  
進(jìn)入國(guó)家日期 1999.05.05  
專利代理機(jī)構(gòu) 中國(guó)專利代理(香港)有限公司  
代理人 羅 宏;齊曾度  
國(guó)省代碼 瑞士;CH  
主權(quán)項(xiàng) 一種曲霉屬(Aspergillus)的酒曲霉菌,該霉菌表達(dá)編碼具有SEQ.ID.NO.2中第1-731位基酸序列的多肽的核酸,使得該霉菌在含0.2%大豆蛋白的基本培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí),表達(dá)至少比野生型米曲霉CNCM I-1882多2倍的內(nèi)肽酶和外肽酶,以及使得該霉菌在至少5mM L-谷氨酰胺存在下仍能表達(dá)內(nèi)肽酶和外肽酶,并表現(xiàn)出提高的脯氨酰-二肽-肽酶活性。  
摘要 本發(fā)明為獲得一種酒曲霉菌,能表達(dá)至少比野生型米曲霉CNCMI-1882多2倍的內(nèi)切和外切肽酶,特別是在含0.2%大豆果實(shí)蛋白的基本培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí),每ml上清表達(dá)至少30mU內(nèi)切肽酶活性,至少30mU亮氨酸-氨基-肽酶活性和至少10mU脯氨酰-二肽-肽酶活性。本發(fā)明也提供一種米曲霉的DNA結(jié)合蛋白(AREA),具有至少序列號(hào)2的從氨基酸1到氨基酸731或其功能衍生物的氨基酸序列。本發(fā)明包括含有編碼本發(fā)明的DNA結(jié)合蛋白的areA基因的DNA分子。第四方面,本發(fā)明提供過(guò)量產(chǎn)生蛋白水解酶的方法,包括在合適的生長(zhǎng)培養(yǎng)基中在合適條件下培養(yǎng)本發(fā)明的酒曲霉菌使霉菌表達(dá)酶并以濃縮形式選擇分離酶。另一方面,本發(fā)明提供利用本發(fā)明的酒曲霉菌水解含蛋白材料。最后一方面,本發(fā)明提供包括用權(quán)利要求1-10的酒曲霉菌發(fā)酵含有蛋白和至少5mM L-谷氨酰胺的材料得到的蛋白水解產(chǎn)物的食物產(chǎn)品。  
國(guó)際公布 1999-01-21 WO1999/002691 英  
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