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酵母表達胸腺肽α1的方法

公開(公告)號 CN1227361C  
公開(公告)日 2005.11.16  
申請(專利)號 CN02136310.2  
申請日期 2002.07.30  
專利名稱 酵母表達胸腺肽α1的方法  
主分類號 C12N15/16  
分類號 C12N15/16;A61K38/32;A61P37/04;A61P31/12;A61P35/00  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權  
申請(專利權)人 浙江大學藥業(yè)有限公司  
發(fā)明(設計)人 陳 智;陳 峰  
地址 310029浙江省杭州市凱旋路268號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 浙江杭州金通專利事務所有限公司  
代理人 吳巧玲  
國省代碼 浙江;33  
主權項 一種酵母表達胸腺肽α1的方法,該胸腺肽α1可用于因胸腺功能低下而造成的疾病的輔助治療,其特征是該方法包括下列步驟:(1)以合成的胸腺肽α1為模板,設計5’GGAAGCTTACCATGGGCTCTGATGCTGCTGTTG3’上游引物和5’TATCTAGATTATGGATCCTAGTTCTCAGC3’下游引物,并在引物上引入HindIII酶切位點和BamHI酶切位點,通過PCR擴增法,得到含HindIII酶切位點和BamHI酶切位點的胸腺肽α1全長基因;(2)以HindIII酶和BamHI酶對胸腺肽α1PCR產(chǎn)物和pYES2質(zhì)粒進行酶切,將雙酶切后的胸腺肽α1PCR產(chǎn)物和pYES2質(zhì)粒在T4連接酶作用下作連接反應,獲得胸腺肽α1重組體;(3)將獲得的胸腺肽α1重組體轉(zhuǎn)化至啤酵母中,使其穩(wěn)定表達人胸腺肽α1蛋白。  
摘要 一種酵母表達胸腺肽α1的方法,是用PCR法擴增得到含HindⅢ酶切位點和BamHⅠ酶切位點的胸腺肽α1全長基因,經(jīng)兩端內(nèi)切酶HindⅢ酶和BamHⅠ酶酶切后克隆至啤酒酵母中穩(wěn)定表達,其表達的胸腺肽α1具有真核細胞的修飾基團,與人體內(nèi)表達的胸腺肽α1結(jié)構(gòu)一致,具有極好的生物學活性,可用于治療腫瘤,抗病毒及免疫缺陷病人的輔助治療及因胸腺功能低下而造成的疾病的輔助治療,也可作為疫苗增強劑使用。還可直接口服,可用于口服制劑的開發(fā)。  
國際公布  
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