公開(公告)號 | CN1197962C |
公開(公告)日 | 2005.04.20 |
申請(專利)號 | CN98124526.9 |
申請日期 | 1998.09.11 |
專利名稱 | 用于測序的改變的熱穩(wěn)定DNA聚合酶 |
主分類號 | C12N9/12 |
分類號 | C12N9/12;C12N9/22;C12N15/09;C12N15/52;C12N15/54;C12N15/64;C12Q1/68;//(C12N9/12,C12R1:07) |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | 1997.9.11 US 058525 |
申請(專利權(quán))人 | 霍夫曼-拉羅奇有限公司 |
發(fā)明(設(shè)計)人 | 戴維·H·蓋爾芬德;莉薩·V·卡爾曼 |
地址 | 瑞士巴塞爾 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進(jìn)入國家日期 | |
專利代理機構(gòu) | 北京市柳沈律師事務(wù)所 |
代理人 | 黃益芬 |
國省代碼 | 瑞士;CH |
主權(quán)項 | 重組的熱穩(wěn)定DNA聚合酶,其特征在于a)所述聚合酶的天然形式包括SEQIDNO:1所示氨基酸序列LeuSerXaaXaaLeuXaaXaaProXaaXaaGlu,其中在該序列的3,6,9和10位的“Xaa”是任何的氨基酸序列,在所述序列第4位的“Xaa”是極性氨基酸,并且在該序列的第7位的“Xaa”是Val或Ile;b)與所述天然序列相比,第4位所述的“Xaa”被突變?yōu)長ys,Arg或His;和c)與所述聚合酶的天然形式相比,所述熱穩(wěn)定DNA聚合酶降低了對摻入帶有熒光素族染料標(biāo)記的核苷酸的辨別力大小。 |
摘要 | 提供了摻入非常規(guī)核苷酸例如用熒光素族染料標(biāo)記的核苷酸的效率增強的修飾的熱穩(wěn)定的DNA聚合酶。這種修飾的熱穩(wěn)定的DNA聚合酶是采用重組DNA技術(shù)制備的。所述聚合酶特別適用于鏈終止核酸測序方法。還提供了編碼本發(fā)明重組熱穩(wěn)定聚合酶的核酸以及含有所述核酸的載體和宿主細(xì)胞。也提供了含有本發(fā)明重組熱穩(wěn)定聚合酶的試劑盒。本發(fā)明的聚合酶和方法在對DNA測序具有成本顯著降低和效率提高的優(yōu)點。 |
國際公布 |