公開(公告)號 | CN1614019A |
公開(公告)日 | 2005.05.11 |
申請(專利)號 | CN200410061039.0 |
申請日期 | 2004.11.03 |
專利名稱 | 人胰島素基因在甲醇酵母中的分泌表達(dá) |
主分類號 | C12N15/17 |
分類號 | C12N15/17;C12N15/81 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 馬延高;馬向東 |
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 馬延高;馬向東 |
地址 | 430056湖北省武漢市漢陽區(qū)沌口經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)綠島花園38棟76門202號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進(jìn)入國家日期 | |
專利代理機(jī)構(gòu) | 武漢開元專利代理有限責(zé)任公司 |
代理人 | 樊戎 |
國省代碼 | 湖北;42 |
主權(quán)項(xiàng) | 一種人胰島素基因在甲醇酵母中的分泌表達(dá),其特征在于:(1)人胰島素基因A、B鏈采用酵母偏愛密碼子;(2)人胰島素A、B鏈分別置于同一甲醇酵母(PichiaPastoris)GS115/pPICM#101、保藏編號為CCTCCNO.M204071中表達(dá)質(zhì)粒pPIC9K的表達(dá)盒α-因子信號肽之后,進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá);(3)其表達(dá)產(chǎn)物成熟并分泌于酵母培養(yǎng)基中,利于分離純化。 |
摘要 | 本發(fā)明涉及一種人胰島素基因的分泌表達(dá),特別是人胰島素基因在甲醇酵母(Pichia Pastoris)GS115/pPICM#101、保藏編號為CCTCCNO.M204071中的分泌表達(dá)。它包括B、A鏈的合成,表達(dá)質(zhì)粒和工程菌構(gòu)建,宿主細(xì)胞的轉(zhuǎn)化,轉(zhuǎn)化子及高表達(dá)量工程菌篩選等步驟。本發(fā)明省去了轉(zhuǎn)肽去掉C鏈等極為復(fù)雜的過程,減少了生產(chǎn)步驟,縮短了工時(shí),因此它具有工藝簡單的優(yōu)點(diǎn),采用本發(fā)明比其它表達(dá)系統(tǒng)高出10-100倍的表達(dá)量,因此大大提高了產(chǎn)量。它為人胰島素工業(yè)化生產(chǎn)提供了一條新的簡捷的途徑。 |
國際公布 |