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人胰島素基因在甲醇酵母中的分泌表達(dá)

公開(公告)號 CN1614019A  
公開(公告)日 2005.05.11  
申請(專利)號 CN200410061039.0  
申請日期 2004.11.03  
專利名稱 胰島素基因在甲醇酵母中的分泌表達(dá)  
主分類號 C12N15/17  
分類號 C12N15/17;C12N15/81  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 馬延高;馬向東  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 馬延高;馬向東  
地址 430056湖北省武漢市漢陽區(qū)沌口經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)綠島花園38棟76門202號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 武漢開元專利代理有限責(zé)任公司  
代理人 樊戎  
國省代碼 湖北;42  
主權(quán)項(xiàng) 一種人胰島素基因在甲醇酵母中的分泌表達(dá),其特征在于:(1)人胰島素基因A、B鏈采用酵母偏愛密碼子;(2)人胰島素A、B鏈分別置于同一甲醇酵母(PichiaPastoris)GS115/pPICM#101、保藏編號為CCTCCNO.M204071中表達(dá)質(zhì)粒pPIC9K的表達(dá)盒α-因子信號肽之后,進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá);(3)其表達(dá)產(chǎn)物成熟并分泌于酵母培養(yǎng)基中,利于分離純化。  
摘要 本發(fā)明涉及一種人胰島素基因的分泌表達(dá),特別是人胰島素基因在甲醇酵母(Pichia Pastoris)GS115/pPICM#101、保藏編號為CCTCCNO.M204071中的分泌表達(dá)。它包括B、A鏈的合成,表達(dá)質(zhì)粒和工程菌構(gòu)建,宿主細(xì)胞的轉(zhuǎn)化,轉(zhuǎn)化子及高表達(dá)量工程菌篩選等步驟。本發(fā)明省去了轉(zhuǎn)肽去掉C鏈等極為復(fù)雜的過程,減少了生產(chǎn)步驟,縮短了工時(shí),因此它具有工藝簡單的優(yōu)點(diǎn),采用本發(fā)明比其它表達(dá)系統(tǒng)高出10-100倍的表達(dá)量,因此大大提高了產(chǎn)量。它為人胰島素工業(yè)化生產(chǎn)提供了一條新的簡捷的途徑。  
國際公布  
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