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一種基因工程重組技術(shù)制備人腦利鈉肽的方法

公開(公告)號 CN1594581A  
公開(公告)日 2005.03.16  
申請(專利)號 CN200410028107.3  
申請日期 2004.07.16  
專利名稱 一種基因工程重組技術(shù)制備人腦利鈉肽的方法  
主分類號 C12N15/62  
分類號 C12N15/62;C12N15/12;C12N15/52;C12N15/81;C12P21/02  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 深圳大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 劉志剛;吉坤美;喻海瓊;高波;張紅云  
地址 518060廣東省深圳市南山區(qū)南油大道2336號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu)  
代理人  
國省代碼 廣東;44  
主權(quán)項(xiàng) 一種基因工程重組技術(shù)制備人腦利鈉肽的方法,包括以下步驟:通過人工合成人腦利鈉肽BNP活性部位的32個(gè)基酸編碼區(qū)相對應(yīng)的基因與經(jīng)突變改造的CMP-3-脫-D-甘露一辛酮糖酸合成酶基因3′端融合,中間含腸激酶識別切割位點(diǎn),該融合基因克隆至酵母表達(dá)載體獲得該融合基因高效表達(dá)的工程酵母菌株,該工程菌經(jīng)發(fā)酵后提取層析純化制備融合蛋白,再經(jīng)腸激酶切割后分離純化獲得重組人腦利鈉肽。  
摘要 本發(fā)明涉及一種基因工程重組技術(shù)制備人腦利鈉肽的方法。通過人工合成人腦利鈉肽BNP活性部位32個(gè)氨基酸編碼區(qū)相對應(yīng)的基因與經(jīng)突變改造的CMP-3-脫氧-D-甘露一辛酮糖酸合成酶基因3′端融合,中間含腸激酶識別切割位點(diǎn),該融合基因克隆至甲酵營養(yǎng)型酵母Pichia表達(dá)載體獲得該融合基因高效表達(dá)的工程酵母菌株,該工程菌經(jīng)發(fā)酵后提取層析純化制備融合蛋白,再經(jīng)腸激酶切割后分離純化獲得重組人腦利鈉肽。該重組肽經(jīng)體外試驗(yàn)表明具備人腦利鈉肽BNP生物活性。  
國際公布  
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