公開(公告)號
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CN1594581A
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公開(公告)日
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2005.03.16
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申請(專利)號
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CN200410028107.3
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申請日期
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2004.07.16
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專利名稱
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一種基因工程重組技術(shù)制備人腦利鈉肽的方法
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主分類號
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C12N15/62
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分類號
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C12N15/62;C12N15/12;C12N15/52;C12N15/81;C12P21/02
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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深圳大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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劉志剛;吉坤美;喻海瓊;高波;張紅云
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地址
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518060廣東省深圳市南山區(qū)南油大道2336號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國省代碼
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廣東;44
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主權(quán)項(xiàng)
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一種基因工程重組技術(shù)制備人腦利鈉肽的方法,包括以下步驟:通過人工合成人腦利鈉肽BNP活性部位的32個(gè)氨基酸編碼區(qū)相對應(yīng)的基因與經(jīng)突變改造的CMP-3-脫氧-D-甘露一辛酮糖酸合成酶基因3′端融合,中間含腸激酶識別切割位點(diǎn),該融合基因克隆至酵母表達(dá)載體獲得該融合基因高效表達(dá)的工程酵母菌株,該工程菌經(jīng)發(fā)酵后提取層析純化制備融合蛋白,再經(jīng)腸激酶切割后分離純化獲得重組人腦利鈉肽。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種基因工程重組技術(shù)制備人腦利鈉肽的方法。通過人工合成人腦利鈉肽BNP活性部位32個(gè)氨基酸編碼區(qū)相對應(yīng)的基因與經(jīng)突變改造的CMP-3-脫氧-D-甘露一辛酮糖酸合成酶基因3′端融合,中間含腸激酶識別切割位點(diǎn),該融合基因克隆至甲酵營養(yǎng)型酵母Pichia表達(dá)載體獲得該融合基因高效表達(dá)的工程酵母菌株,該工程菌經(jīng)發(fā)酵后提取層析純化制備融合蛋白,再經(jīng)腸激酶切割后分離純化獲得重組人腦利鈉肽。該重組肽經(jīng)體外試驗(yàn)表明具備人腦利鈉肽BNP生物活性。
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國際公布
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