公開(公告)號
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CN1468965A
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公開(公告)日
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2004.01.21
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申請(專利)號
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CN03117040.4
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申請日期
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2003.05.16
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專利名稱
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SARS病毒的基因檢測試劑盒及檢測方法
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主分類號
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C12Q1/68
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分類號
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C12Q1/68;C12Q1/25
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院;杭州博賽基因診斷技術(shù)有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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李蘭娟;姜漢卿;沃健兒;吳南屏;邵俊斌
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地址
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310003浙江省杭州市上城區(qū)慶春路79號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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杭州天正專利事務(wù)所
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代理人
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王兵;黃美娟
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國省代碼
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浙江;33
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主權(quán)項(xiàng)
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一種SARS病毒的基因檢測試劑盒,包括SARS病毒特異性核酸定量標(biāo)準(zhǔn)品,即SARS的部分序列:5’-TACCGTAGACTCATCTCTATGATGGGTTTCAAAATGAATTACCAAGTCAATGGTTACCCTAATATGTTTATCACCCGCGAAGAAGCTATTCGTCACGTTCGTGCGTGGATTGGCTTTGATGTAGAGGGCTGTCATGCAACTAGAGATGCTGTGGGTACTAACCTACCTCTCCAGCTAGGATTTTCTACAGGTGTTAACTTAGTAGCTGTACCGACTGGTTATGTTGACACTGAAAATAACACAGAATTCACCAGAGTTAATGCAAAACCTCCACCAGGTGACCAGTTTAAACATCTTATACC-3’其特征在于所述的試劑盒還包括以下組分:(1)熒光擴(kuò)增檢測試劑:由一步法RT-PCR緩沖液、脫氧三磷酸核苷(dNTP)混合物、特異擴(kuò)增引物及特異探針以蒸餾水為溶劑混合而成,所述的特異性引物是:引物S1:引物序列為5′-CCAAGTCAATGGTTACCCTAATATGTT-3′引物S2:引物序列為5′-GTTAGTACCCACAGCATCTCTAGTT-3′所述的特異性探針是:探針S3:探針序列為5′-R-AGCCCTCTACATCAAAGCCAATCCACGC-Q-3′R為報(bào)告熒光基團(tuán),Q為淬滅熒光基團(tuán)。(2)DNA聚合酶(3)防止污染的尿嘧啶糖基酶(UNG);(4)用于逆轉(zhuǎn)錄的逆轉(zhuǎn)錄酶。
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摘要
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一種SARS病毒的基因檢測試劑盒及檢測方法,以SARS病毒特異性核酸定量標(biāo)準(zhǔn)品為對照,包括RNA提取,聚合物酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增及熒光檢測,所述的檢測方法直接用待測病人的靜脈血標(biāo)本或漱口液或呼吸道分泌物為分析樣本,提取出樣本中的RNA作為核酸模板,再對核酸模板進(jìn)行熒光聚合物酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增,所用的熒光擴(kuò)增檢測試劑包括一步法RT-PCR緩沖液、脫氧三磷酸核苷(dNTP)混合物、及特異擴(kuò)增引物及特異探針。這種檢測方法快捷,方便,能夠盡快確診病人的分泌物或血液中是否存在SARS病毒,有效減少SARS病毒在人群中傳播。
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國際公布
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