公開(公告)號 | CN1132936C |
公開(公告)日 | 2003.12.31 |
申請(專利)號 | CN01107824.3 |
申請日期 | 2001.02.23 |
專利名稱 | 海水魚淋巴囊腫病毒的純化方法 |
主分類號 | C12N7/02 |
分類號 | C12N7/02 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 國家海洋局第一海洋研究所 |
發(fā)明(設(shè)計)人 | 孫修勤;曲凌云;張進(jìn)興 |
地址 | 266061山東省青島市仙霞嶺路1號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進(jìn)入國家日期 | |
專利代理機(jī)構(gòu) | 青島海昊知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所有限公司 |
代理人 | 張中南 |
國省代碼 | 山東;37 |
主權(quán)項 | 一種海水魚淋巴囊腫病毒的純化方法,其特征步驟是A、取病魚體表囊腫物每20g左右,用無菌生理鹽水多次洗凈,再用組織研磨器研碎,然后加無菌TE緩沖液200ml,在室溫下、-20℃凍融4次,之后將上述融液用孔徑為8、3、0.8和0.3μm的微孔濾膜從大到小依次抽濾,再將濾液移入透析袋中用聚乙二醇2000濃度縮至7ml左右,便可取得該病毒懸液移入無菌的試管中,B、將配制好濃度為50%、40%、30%、20%和15%的蔗糖溶液,各取1ml,依次注入離心管中、并靜靜重層,然后,吸上述濾膜過濾的病毒懸液1ml,靜靜注于離心管內(nèi)重層的蔗糖溶液上方2400rmp離心2小時,離心后即得純度高的病毒。 |
摘要 | 本發(fā)明涉及一種海水魚淋巴囊腫病毒的純化方法。它是采用微孔濾膜過濾法和蔗糖密度梯度離心法相結(jié)合的方法,并考慮到盡量減小污染和保證無菌操作條件制成。本發(fā)明的特點是可以獲得高純度和高得率的淋巴囊腫病毒,以滿足制備疫苗或作為病毒基因?qū)W、致病基因篩選和克隆技術(shù)使用的病毒。 |
國際公布 |
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