| 公開(公告)號(hào) | CN101049508A |
| 公開(公告)日 | 2007.10.10 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200710052155.X |
| 申請(qǐng)日期 | 2007.05.11 |
| 專利名稱 | 攜帶結(jié)核分支桿菌Ag85B的減毒傷寒桿菌載體疫苗 |
| 主分類號(hào) | A61K48/00(2006.01)I |
| 分類號(hào) | A61K48/00(2006.01)I;A61K39/385(2006.01)I;A61K39/04(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 武漢大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 章曉聯(lián);王 坤 |
| 地址 | 430072湖北省武漢市武昌珞珈山 |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 |
| 代理人 | 王守仁 |
| 國(guó)省代碼 | 湖北;42 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種減毒傷寒桿菌載體疫苗，其特征是一種攜帶結(jié)核分支桿菌Ag85B的減毒傷寒桿菌載體疫苗，該疫苗由包括以下步驟的方法制得： (1)原核重組表達(dá)質(zhì)粒pGEX-Ag85B的制備： 利用PCR方法對(duì)目的基因即Ag85B的BX842578基因序列中的121-975位進(jìn)行擴(kuò)增，再提取原核表達(dá)質(zhì)粒pGEX-KG，并經(jīng)酶切回收及鑒定，獲得pGEX-Ag85B； (2)真核重組表達(dá)質(zhì)粒pVAX1-Ag85B的構(gòu)建： 將鑒定成功的原核重組質(zhì)粒pGEX-KG-Ag85B轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)菌E.coliBL21，經(jīng)培養(yǎng)、陽(yáng)性克隆和酶切鑒定后，使含有重組表達(dá)質(zhì)粒的E.coliBL21在LB(Amp+)培養(yǎng)液中培養(yǎng)、接種和誘導(dǎo)培養(yǎng)，再經(jīng)離心收集菌體及超聲碎菌后，提取融合蛋白，然后經(jīng)純化和鑒定分析，即得到真核重組表達(dá)質(zhì)粒pVAX1-Ag85B； (3)攜帶結(jié)核分支桿菌Ag85B的減毒傷寒桿菌載體疫苗的制備： 將鑒定正確的pVAX-1-Ag85B電轉(zhuǎn)入減毒傷寒桿菌LB5000及SL7207菌株，并通過抗生素陽(yáng)性克隆篩選及提取質(zhì)粒酶切鑒定；再經(jīng)動(dòng)物攻毒實(shí)驗(yàn)檢測(cè)疫苗的免疫保護(hù)效力，即得到所述疫苗。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種攜帶結(jié)核分支桿菌Ag85B的減毒傷寒桿菌載體疫苗，其由包括原核重組表達(dá)質(zhì)粒pGEX-Ag85B的制備、真核重組表達(dá)質(zhì)粒pVAX1-Ag85B的構(gòu)建以及所述抗結(jié)核的減毒傷寒桿菌載體疫苗的制備步驟的方法制得。本發(fā)明首次運(yùn)用了以減毒鼠傷寒桿菌為載體的結(jié)核Ag85B疫苗的有效應(yīng)用研究，開辟了一種新型有效的結(jié)核疫苗的途徑；與DNA疫苗等相比的優(yōu)點(diǎn)是，本疫苗能口服，臨床實(shí)用性強(qiáng)，制備簡(jiǎn)易、成本低，通常一次免疫即可誘發(fā)有效抵抗結(jié)核感染的免疫應(yīng)答，并具有安全、高效、簡(jiǎn)便和經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn)。 |
| 國(guó)際公布 |
