天然活性肽的分離提取 存在于細(xì)菌、真菌、動(dòng)植物等生物體內(nèi)的激素、酶抑制劑等天然活性肽,經(jīng)分離提取而得。
食品蛋白質(zhì)水解制取活性肽 一般采用酸水解,工藝簡(jiǎn)單、成本低,但因氨基酸受損嚴(yán)重、水解難控制而較少應(yīng)用。
化學(xué)合成活性肽 采用液相或固相化學(xué)合成法可制取任意需要的活性肽,但因成本高、副反應(yīng)物及殘留化合物多等因素而制約其發(fā)展。
基因重組法制取活性肽 采用DNA重組技術(shù)制取活性肽的試驗(yàn)研究尚在進(jìn)行中。
酶法生產(chǎn)活性肽 產(chǎn)品安全性極高,生產(chǎn)條件溫和,水解易控制,可定位生產(chǎn)特定的肽,成本低,已成為最主要的生產(chǎn)方法。
酶法生產(chǎn)活性肽工藝一般流程為:選擇原料蛋白→預(yù)處理→酶解→精制→成品
原料選擇原則 根據(jù)所需生產(chǎn)的活性肽的氨基酸組成或結(jié)構(gòu)特點(diǎn)來選擇相應(yīng)原料;選用廉價(jià)農(nóng)副產(chǎn)品、食品工業(yè)廢水及廢物,開展綜合利用,變廢為寶,減少環(huán)境污染,降低生產(chǎn)成本。
酶的選擇主要是對(duì)酶按原料蛋白組成與酶的專一性進(jìn)行篩選,也可根據(jù)活性肽的結(jié)構(gòu),應(yīng)用酶工程生產(chǎn)高活性特定酶。由于單一酶系往往轉(zhuǎn)化效果不佳,采用復(fù)合酶系降解作用較好。
酶法生產(chǎn)活性肽的下游技術(shù)主要包括分離、精制和分析試驗(yàn)。由于目標(biāo)活性肽在生產(chǎn)反應(yīng)體系中含量甚微,傳統(tǒng)分離技術(shù)往往無能為力,必須采用吸附分離、色譜分離、超濾膜分離、反滲透等現(xiàn)代分離技術(shù)和脫色、脫臭、脫苦等提純精制技術(shù)。尤其是苦味直接影響食品的風(fēng)味和口感醫(yī),學(xué),全,在,線,提,供m.zxtf.net.cn,往往決定了活性肽的應(yīng)用前景,因此,脫苦技術(shù)研究日盛。研究發(fā)現(xiàn),蛋白質(zhì)酶解液中的苦味主要來自于苦味肽──由某些疏水基因及疏水性氨基酸構(gòu)成的苦味物質(zhì)。要脫苦則必須使這些堿性氨基酸從苦味上解放出來。應(yīng)用微生物直接脫苦效果好,很有發(fā)展前景,如端肽酶能從線性肽鏈的末端移去若干個(gè)氨基酸分子,使苦味肽的苦味減輕,對(duì)于完整的環(huán)形結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)大分子,端肽酶無法發(fā)揮作用,必須先用內(nèi)切酶切斷肽鏈,再用端肽酶脫苦。通常將內(nèi)切酶與端肽酶聯(lián)合使用。以水解疏水性氨基酸殘基及脯氨酸構(gòu)成肽鏈的端肽酶脫苦作用最有效。由于肽酶價(jià)格昂貴,限制了其在食品工業(yè)上的應(yīng)用。乳酸菌、釀酒酵母等微生物的內(nèi)源酶中存在著廣泛的肽酶譜系,同樣具有較好的脫苦作用,且價(jià)格低廉、來源廣泛,很有發(fā)展前景。