胃上皮化生和幽門螺桿菌超微結構的觀察

　　為研究和證實十二指腸胃上皮化生(GM)與幽門螺桿菌及（Hp)十二指腸潰瘍的發(fā)生之間關系作者進行了如下超顯微結構的觀察，現(xiàn)報告如下。

　　1 材料和方法

　　1.1 材料 均為我院內鏡檢查的患者，內鏡檢查結合病理切片觀察嚴格選材，18例球部標本，其中十二指腸潰（DU)13例，慢性十二指腸炎3例，正常十二指腸2例；1例竇部標本（有活動性炎質)作透射電鏡觀察，8例球部標本，包括DU5例，慢性十二指腸炎2例，正常十二指腸1例作掃描電鏡觀察。球部標本一塊放入4%戊二醛固定液內做電鏡觀察，另一塊放入10%福爾馬林液固定，作組織化學染色。

　　1.2 方法

　　1.2.2 透射電鏡觀察 采用日立牌H700型透射電鏡。標本常規(guī)在4%戊醛內固定和在1%四氧化鋨（OsO4)的1h后脫水，包埋，先制備1μm厚的半薄切片，1%NaOH溶于酒精作軟化劑，軟化樹脂20min至1h，常規(guī)HE染色后在光鏡下定位，制500nm超薄切片，醋酯雙氧鈉，檸檬酸鋁雙染色后電鏡觀察。

　　1.2.2 掃描電鏡觀察 為上述透射電鏡之掃描附件。固定同上；丙酮梯度脫水；醋酸異戊脂置換；CO₂臨界點干燥；立體顯微鏡下定位；離子噴鍍儀鍍鉑后觀察。

　　1.2.3 復染色方法 將數(shù)塊活檢標本放入盛有1～2ml生理鹽水的無菌試管內，以3000轉/分 轉速離心后取懸液，用Formvar-碳沫酮附上述懸液2min,1%～2%磷鎢酸水溶液（pH6.5～7.4)染色1min～2min后，立即在透射電鏡下觀察。

　　2 結果

　　用AB（pH2.5)/PAS染色，根據(jù)十二指腸絨毛上皮形態(tài)，分化程度將其分為正常、胃上皮化生（Ⅰ型-分ⅠA和ⅠB兩亞型和不表現(xiàn)明顯上皮化生（Ⅱ型無奇不有類，見表1。

　　A表現(xiàn)為絨毛萎縮、粘膜表面呈波浪狀，粘膜表層上皮完全由化生的胃表面粘液細胞（即GMC)組成。GMC胞漿內含大量的PAS陽性物質，化生區(qū)無杯狀細胞（圖略)。18例DU有6例呈ⅠA表現(xiàn)，內鏡下大多有明顯潰瘍灶，邊緣有瘢痕組織形成，底部無明顯苔膜覆蓋，甚至潰瘍被瘢痕組織填平（即H期和S期)。ⅠB型表現(xiàn)為絨毛形狀在萎縮到正常之間，可見正常杯狀細胞和吸收細胞點綴在GGM之間，GMC胸漿內只有少量的PAS陽性物質（圖略)。10例DU和2例慢性十二指腸炎表現(xiàn)為ⅠB型改變，內鏡下表現(xiàn)有明顯潰瘍灶及周邊明顯充血、水腫，底部有較厚的苔膜覆蓋（即A期)。Ⅱ型表現(xiàn)為杯狀細胞、吸收細胞和絨毛形狀正常，在吸收細胞胸漿內見PAS陽性小滴，杯狀細胞數(shù)量可輕度增加。2例DU表現(xiàn)為Ⅱ型改變，內鏡下表現(xiàn)粘膜明顯充血、水腫和滲出及淺表潰瘍的形成，為潰瘍早期階段。3例內鏡下正常十二指腸粘膜組織學上亦正常。

表1 DU邊緣粘膜表面形態(tài)學分型

　　^△GMC：the metapiastic gastric surface mucus secreting cells

　　透射電鏡觀察，正常杯狀細胞游離面是由大量指狀微絨毛密集平行排列形成紋狀緣，微絨毛表面覆以質膜及分支狀多糖-蛋白質復全物（glycocaluyx,GX)，胞質內含有各種細胞器，如豐富的滑面內質網(wǎng)，許多粗面內質網(wǎng)，發(fā)達的高爾基復合體以及線粒體和溶酶體，胸質內無粘原顆粒。光鏡下表現(xiàn)為Ⅱ型的吸收細胞表面策絨毛排列紊亂、斷裂，相鄰微絨毛互相融合增寬，有時微絨毛受侵，在質膜下僅見一個完整的微絨毛核心，微絨毛外層的多糖-蛋白質復合物中斷、變薄甚至消失。胸漿內無明顯粘原顆粒，細胞器形態(tài)及排列正常；ⅠB型的吸收細胞除表現(xiàn)為上述微絨毛改變外，胞漿內見大小不等，分布不均和電子密度不同的粘原顆粒。細胞器萎縮，消失或被擠壓在胸漿兩側。在GMC之間可見到正常的杯狀細胞；ⅠA型吸收細胞除表現(xiàn)ⅠB型外，胞漿內粘原顆粒更為密集、豐富，有時在細胞表面可見到粘液層。GMC形態(tài)與胃表面粘液柱門面細胞相似；掃描電鏡觀察，GM區(qū)表面絨毛萎縮，紊亂甚至平坦，表面粗糙呈顆粒狀。

　　3例DU邊緣粘膜組織和1例竇部組織光鏡下和電鏡下發(fā)現(xiàn)Hp。透射電鏡下，球部及竇部所見Hp形態(tài)特征相似，胞壁具有雙層膜結構，在兩層膜間常見局部加寬，在菌體一端可見1～4條有鞘鞭毛，有時可見箍縮分裂相。Hp均局限在胃上皮化生區(qū)，與GMC膜間常以垂直方向的絲狀物相連，此絲狀物附著處及其附近微絨毛斷裂、消失或增寬，菌體周圍組織被溶解，并可見游離的細胞碎片、粘膜破壞，失去連續(xù)性等現(xiàn)象（圖略)。兩例DU邊緣活檢組織復染樣本中，1例檢出Hp，其形態(tài)特征與竇部檢出的Hp相似。

　　3 討論

　　十二指腸胃上皮化生（GM)是指十二指腸粘膜，特別是球部膜出現(xiàn)了胃粘膜表層粘液柱狀上皮細胞，化生區(qū)上皮細胞PAS反應陽性。本文結果提示，GM主要發(fā)生在有明顯炎癥的球部，特點常見于DU邊緣部，正常十二指腸球部和十二指腸降段粘膜很少見。本文認為，GM是DU的組織學特征，組織形態(tài)上表現(xiàn)為ⅠA、ⅠB和Ⅱ型的改變是粘膜表面上皮在向胃上皮化生過程中分化程度不同的結果，因而能客觀地反映潰瘍的進展程度和愈合程度。即Ⅱ型為粘膜遭受損害后潰瘍形成的早期階段；ⅠA型為潰瘍周圍陳舊的具有保護作用的愈合階段；而ⅠB型為介于Ⅱ型和ⅠA型潰瘍愈合過程中的中間階段，與Greogery的結果一致。部分無明顯潰瘍灶但有GM發(fā)生的十二指腸炎實際是DUⅡ型或ⅠB型階段，性質不同于慢性十二指腸炎，治療應按DU治療。

　　Patrick等的研究發(fā)現(xiàn)，十二指腸粘膜上皮的形態(tài)學改變（即GM)更容易發(fā)生在胃酸過多的病人中，即胃酸和GM的發(fā)生有關。本文結果顯示，十二指腸內的幽門螺桿菌和胃竇部中的幽門螺桿菌形態(tài)特征相似，與馮瑞娥等用透射電鏡觀察到的Hp和胃粘膜上皮細胞間的連接方式和細菌的形態(tài)特征相同。Hp通過特殊的絲狀物與GM細胞相連，并觀察到Hp可損害十二指腸粘膜，可能是直接或是其分泌的蛋白水解酶等作用的結果。認為Hp是DU的致病細菌，同時發(fā)現(xiàn)組織學上有GM的DU并非均有Hp感染，說明Hp僅僅是引起DU的原因之一，DU發(fā)病的原因是胃酸和Hp共同作用的結果，即在胃酸的作用下，十二指腸發(fā)生胃上皮化生為Hp提供了感染條件，Hp的感染可能加速了潰瘍的形成，并可能影響潰瘍的愈合和預后。因此，對DU的治療應該是以抑制胃酸分泌和中和胃酸為主，輔以抗菌藥物治療，可以達到促進潰瘍愈合和預防復發(fā)和目的。

蘇秉忠1 張國榮2

1內蒙古醫(yī)學院附屬消化內科（呼和浩特 010050)

2內蒙工人包頭療養(yǎng)院療養(yǎng)科（包頭 014030)