全自動生化分析儀具有微量、快速、多項、準(zhǔn)確、重復(fù)性好等特點(diǎn)。隨著全自動生化分析儀的廣泛應(yīng)用，其測定過程中存在的交叉污染問題也受到關(guān)注。分析儀使用同一根試劑針吸取試劑，雖然分析儀有清洗系統(tǒng)，但試劑針很難通過一次短暫快速的清洗程序就清洗干凈，一個項目對隨后的一個項目甚至幾個項目都會帶來一定程度的試劑污染，并且隨著儀器使用時間的增加，試劑交叉污染程度會有所加劇。在工作中我們發(fā)現(xiàn)測定血脂后測定的總膽汁酸（TBA)，再復(fù)查時與醫(yī).學(xué)全在線m.zxtf.net.cn原來測定值有差異，為研究血脂試劑是否都影響TBA測定，我們實驗觀察了TC，TG，HDL，LDL等試劑，對TBA是否存在交叉污染的情況進(jìn)行分析，報告如下。
1．材料與方法
1.1 儀器與試劑 OLYMPUS AU640全自動生化分析儀由日本OLYMPUS公司提供，TC，TG，HDL，LDL試劑由日本協(xié)和試劑提供，TBA由日本第一化學(xué)試劑提供。
1.2 測定方法
1)首先對儀器進(jìn)行保養(yǎng)，對比色杯、攪拌棒、試劑針進(jìn)行浸泡清洗，以排除儀器本身原因?qū)Y(jié)果的影響。
2)從當(dāng)天送檢標(biāo)本中提取血清，制備混合血清，取10份血清連續(xù)分別檢測TBA，此組數(shù)據(jù)設(shè)為TBA。
3)再取50份血清，從1號到50號排序，1號檢測TC，2，3，4，5號檢測TBA；6號檢測TC，7，8，9，10號檢測TBA；11號檢測TC，12，13，14，15號檢測TBA；16號檢測TC，17，18，19，20號檢測TBA；以此類推，檢測到50號。將2，6，12，16，22，26，32，36，42，46數(shù)據(jù)設(shè)為TC S1，將3，7，13，17，23，27，33，37，43，47數(shù)據(jù)設(shè)為TC S2，以此類推，得出數(shù)據(jù)TC S3，TC S4。
4)以同樣的方法得出數(shù)據(jù)TG S1~S4，HDL S1~S4，LDL S1~S4。
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS軟件，進(jìn)行配對t檢驗。
2 ．結(jié)果
1)TBA與測定血脂后TBA測定值比較見表1。
表1 TBA與測定血脂后TBA測定值比較（略)
TBA數(shù)據(jù)分別與S1，S2，S3，S4進(jìn)行比較，結(jié)果見表2。在TC，HDL組，TBA與S1，S2，S3比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05)，與S4比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05)。在TG，LDL組，TBA與S1比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05)，與S2，S3，S4比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05)。
2)分別取TC，TG，HDL，LDL試劑2各10份，作為標(biāo)本檢測TBA，結(jié)果見表3。
表2 TBA分別與S1，S2，S3，S4配對t檢驗P值表（略)
表3 血脂試劑2中TBA含量（略)
3．討論
OLYMPUS AU640全自動生化分析儀的試劑針要接觸試劑盤中的各種試劑，每種不同項目間的吸取僅有一次沖洗過程，如果存在試劑交叉污染，將會對分析結(jié)果造成很大影響。由表2中可以看出血脂試劑對TBA檢測存在嚴(yán)重的交叉污染（P＜0.05)。TC，HDL試劑可以影響TBA三個測試，TG，LDL試劑可以影響TBA一個測試。試劑間的交叉污染原因是多方面的，主要有三個：第一，試劑成分中含有某種被污染的項目；第二，試劑中含有下一個測試所要測定底物或含有的某種試劑成分，與下一反應(yīng)所測定的底物有作用，因而直接影響下一反應(yīng)測定的結(jié)果；第三，該試劑所引導(dǎo)的反應(yīng)給下一個項目反應(yīng)進(jìn)程帶來了間接干擾。從表3看出TC，HDL試劑2中對TBA正干擾物質(zhì)含量比較高，TG，LDL試劑2中對正干擾物質(zhì)含量少一些，這與表1交叉污染結(jié)果是一致的。對于血脂試劑中對TBA檢測產(chǎn)生正干擾的物質(zhì)的分析，從試劑成分看，血脂試劑2中均含有過氧化物酶，但未標(biāo)明其含量，它是否增強(qiáng)了TBA循環(huán)酶反應(yīng)，還是有其他物質(zhì)增強(qiáng)了反應(yīng)，有待于進(jìn)一步探討。在檢測中為避免血脂試劑對TBA檢測的影響，首先可以更改儀器參數(shù)，增加試劑針清洗次數(shù)；其次，可以調(diào)整試劑位，在血脂檢測與TBA測試之間，加做幾個對TBA無干擾的檢測項目；還可以運(yùn)用儀器本身的預(yù)防交叉污染程度、TBA反應(yīng)程序控制項目的反應(yīng)次序，先測試TBA，再測試血脂。但因為在實際工作中，標(biāo)本編排次序和項目組合的隨機(jī)性比較大，有時很難避開交叉污染，所以在編排標(biāo)本檢測順序時，一定要考慮到血脂項目對
TBA的影響。
由于試劑成分的復(fù)雜多樣性，實時儀器狀況的獨(dú)特性，可能發(fā)生的試劑間交叉污染的情況不盡相同，要想得到正確可靠的結(jié)果，不但要熟練掌握儀器操作，對儀器要精心維護(hù)和保養(yǎng)，也要了解各反應(yīng)的原理，試劑組成，才能在實際工作中發(fā)現(xiàn)和避免試劑間的交叉污染。
