生理學-實驗指導:影響離體蛙心活動的因素

1.觀察K⁺、Na⁺、Ca²⁺三種離子、去甲腎上腺素、乙酰膽堿、酸堿度等因素對心臟活動的影響，理解心臟的正�；顒有枰�一個適當?shù)睦砘�環(huán)境。
2.學習離體蛙心灌流方法，了解麗人器官的研究方法。

心臟的正常節(jié)律性活動必須在適宜的環(huán)境里才能維持，一旦適宜的理化環(huán)境被干擾或破壞，心臟活動就會受到影響。心臟受植物性神經(jīng)的雙重支配，交感神經(jīng)興奮時，其末梢釋放去甲腎上腺素，使心肌收縮力增強，傳導加快；而迷走神經(jīng)興m.zxtf.net.cn/rencai/奮時，其末梢釋放乙酰膽堿，使心肌收縮力減弱，心率減慢。
蛙心臟離體后，用理化特性近似于其血漿的任氏液灌流，在一定時間內(nèi)，可保持節(jié)律性收縮和舒張。改變灌流液的組成成分，心臟跳動的頻率好幅度會隨之發(fā)生改變。

一、蛙心插管制備
1.取蛙一只，用刺針破壞腦和脊髓，暴露心臟。
2.用小鑷子夾起心包膜，仔細分別心房、心室、動脈圓錐、主動脈、靜脈竇、前后腔靜脈等。
3.m.zxtf.net.cn/jianyan/在右主動脈下穿一根線并結(jié)扎。再在左右主動脈下穿一根線備用。用玻璃分針將心尖向上翻至背面。以備用線將前后腔靜脈好左右靜脈一起結(jié)扎。將心臟回復至原位、在左主動脈下穿兩根線。用一線結(jié)扎左主動脈遠心端，另一線備用。提起左主動脈遠端綁線。用眼科剪在左主動脈上靠近動脈圓錐處剪一斜口，將盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入主動脈，插至動脈圓錐時，略向后退，在心室收縮時，向心室后壁方向下插經(jīng)動脈瓣插入心室腔內(nèi)。插管若成功進入心室，管內(nèi)液面會隨著心室搏動而上下移動。用左主動脈下近心端的備用線結(jié)扎插管，并將結(jié)扎線固定于插管側(cè)面的小突起上。
4.提起插管，在結(jié)扎線遠端分別剪斷左主動脈和右主動脈；剪斷左右肺靜脈和前后腔靜脈，將心臟離體。用滴管吸凈插管內(nèi)余血，加入新鮮任氏液，反復數(shù)次，直到液體完全澄清。保持灌流液面高度恒定（1~2cm)，即可進行實驗。

圖 1  蛙心臟示意圖（a、b、c分別為結(jié)扎線)

二、實驗裝置
用試管夾將蛙心插管固定于鐵支架上（圖2)。將蛙心夾上的線連至機械—電換能器的著力點上。將機械-電換能器連至BL-420系統(tǒng)。

圖 2  離體蛙心恒壓灌流裝置

三、觀察項目
1.描記正常蛙心收縮曲線
2.離子影響
3.遞質(zhì)的影響
    4.溫度的影響
    5.酸堿的影響