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公共衛(wèi)生醫(yī)學論文辛伐他汀內(nèi)皮細胞VEGF和Ang-2表達的作用及其機制的分析
1 引言
糖尿病性視網(wǎng)膜病變（diabetic retinopathy, DR)是嚴重的致盲性眼病，其發(fā)病機制目前尚未完全明了。最近，線粒體活性氧（reactive oxygen species ,ROS)在血管內(nèi)皮細胞損傷中的作用受到關注。高血糖誘導線粒體ROS生成增加，引起DNA損傷，使得DNA修復酶聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(Poly-(ADP-ribose) polymerase, PARP)過度激活，通過裂解底物ＮＡＤ+生成大量的(ＡＤＰ-核糖)聚合物（poly(ADP-ribose)，PAR )和尼克酸, 大量的PAR積聚在3-磷酸甘油醛脫氫酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH)等周圍，使其發(fā)生ＡＤＰ-核糖基化。GAPDH核糖基化后活性受到抑制，從而觸發(fā)信號級聯(lián)放大，引起山梨醇的聚積、AGEs 的形成、PKC 的激活和氨基己糖途徑活性增強, 導致血管內(nèi)皮細胞損傷，最終發(fā)生終末器官的損害。這是班廷獎得主Brownlee教授新近提出的糖尿病并發(fā)癥發(fā)病的統(tǒng)一機制學說的主要內(nèi)容。因此，線粒體ROS成為DR有效防治的重要靶點。醫(yī).學.全.在.線網(wǎng)站提供。
他汀類藥物是3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A（HMG－CoA)還原酶抑制劑，HMG－CoA還原酶是膽固醇合成酶系中的限速酶，通過對此酶的抑制，此類藥物可阻斷細胞內(nèi)甲羥戊酸代謝途徑，競爭性抑制膽固醇的生物合成，使細胞內(nèi)膽固醇減少等，從而發(fā)揮其降血脂作用。近年來發(fā)現(xiàn)他汀類藥物還具有不依賴于其降脂效果的多樣性的保護作用,包括抗氧化應激作用。本文旨在探討辛伐他汀對高糖誘導下牛視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞(retinal bovine retinal endothelial cell,BREC) 血管內(nèi)皮生長因子（vascμlar endothelial growth factor, VEGF)和血管生成素-2（Angiopoietin-2, Ang-2)表達的作用，并闡明其作用機制。
2 材料和方法
2.1 牛視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)BREC培養(yǎng)
采用選擇性培養(yǎng)方法，具體培養(yǎng)及鑒定方法參見以往。主要步驟：牛眼（上海清真食品公司屠宰場提供)冰上運輸，2 h內(nèi)處理。清除眼外肌和筋膜，消毒碘和慶大霉素溶液浸泡眼球。自角膜緣后約3 mm處剪除眼前段，去除玻璃體，無菌取出視網(wǎng)膜置于盛有冰D-Hanks液的平皿內(nèi)，解剖鏡下清洗去除殘留的可見色素，剪除可見大血管并剪碎視網(wǎng)膜。4℃，1,800 rpm離心5min。棄除上清液，加入5倍體積含有0.05%膠原酶和0.025% BSA的PBS，5% CO2培養(yǎng)箱內(nèi)37 ℃孵育45min，再經(jīng)網(wǎng)孔88 μm不銹鋼篩1 引言糖尿病性視網(wǎng)膜病變（diabetic retinopathy, DR)是嚴重的致盲性眼病，其發(fā)病機制目前尚未完全明了。最近，線粒體活性氧（reactive oxygen species ,ROS)在血管內(nèi)皮細胞損傷中的作用受到關注。高血糖誘導線粒體ROS生成增加，引起DNA損傷，使得DNA修復酶聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(Poly-(ADP-ribose) polymerase, PARP)過度激活，通過裂解底物ＮＡＤ+生成大量的(ＡＤＰ-核糖)聚合物（poly(ADP-ribose)，PAR )和尼克酸, 大量的PAR積聚在3-磷酸甘油醛脫氫酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH)等周圍，使其發(fā)生ＡＤＰ-核糖基化。GAPDH核糖基化后活性受到抑制，從而觸發(fā)信號級聯(lián)放大，引起山梨醇的聚積、AGEs 的形成、PKC 的激活和氨基己糖途徑活性增強, 導致血管內(nèi)皮細胞損傷，最終發(fā)生終末器官的損害[1，2]。這是班廷獎得主Brownlee教授新近提出的糖尿病并發(fā)癥發(fā)病的統(tǒng)一機制學說的主要內(nèi)容[3]。因此，線粒體ROS成為DR有效防治的重要靶點。
