桂枝茯苓丸—肉桂酸的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定桂枝茯苓丸中肉桂酸的含量。

本方法適用于中成藥桂枝茯苓丸。

供試品置具塞錐形瓶中，加入甲醇超聲提取，放冷，搖勻，濾過，濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長285nm處檢測肉桂酸的吸收值，計(jì)算出其含量。

1.乙腈（色譜純)

2.磷酸

1儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2色譜柱

Kromasil-C₁₈柱(4.6mm×250mm,5μm)

1.3 紫外吸收檢測器

2.色譜條件

2.1流動(dòng)相：乙腈 0.1%磷酸溶液 = 30 70

2.2檢測波長：285nm

2.3柱溫：室溫

2.4流速：1.0mL/min

1.稱取供試品

取桂枝茯苓丸10g，切碎，精密稱定。

2.對照品溶液的制備

精密稱取肉桂酸對照品10mg精密稱定，置100mL棕色量瓶中，加50%甲醇稀釋到刻度，搖勻，精密量取5mL，置100mL棕色量瓶中加50%甲醇稀釋到刻度，搖勻，即得5μg/mL的肉桂酸對照品溶液。

3.標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

精密吸取1.0，3.0，5.0，7.0，9.0mL(0.1mg/mL)的肉桂酸對照品溶液分別置100mL棕色瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，作為繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.供試品溶液的制備

將供試品置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，稱定重量，超聲處理30min，放置室溫后，稱重，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，棄去初濾液，收集續(xù)濾液作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

精密吸取5.3項(xiàng)下的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液各10μL，分別注入液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長285nm處測定肉桂酸的峰面積積分值，以峰面積積分值對濃度進(jìn)行回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.樣品測定

分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長285nm處測定肉桂酸的峰面積積分值，用外標(biāo)法計(jì)算出肉桂酸的含量。