方法名稱： |
黃連上清丸—黃芩甙的測(cè)定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定黃連上清丸中黃芩甙的含量。 本方法適用于中成藥黃連上清丸。 |
方法原理： |
將供試品加甲醇超聲提取，加水定容，離心，取上清液即為供試品液。精密吸取供試品液20µL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)275nm處檢測(cè)黃芩甙吸收值，以外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
試劑： |
1. 甲醇（色譜純) 2. 醋酸銨 |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 Shim-Pack CLC-ODS 柱 (150 × 6mm)。 1.3 紫外吸收檢測(cè)器 2 色譜條件 2.1 流動(dòng)相：甲醇 醋酸銨 = 40 60 2.2 流速：1mL/min 2.3 檢測(cè)波長(zhǎng)：275nm 2.4 柱溫：室溫
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試樣制備： |
1. 稱取供試品 精密稱取本品粉末(過40目篩) 0.1g。 2. 對(duì)照品溶液的制備 準(zhǔn)確稱取黃芩甙10mg，置10mL容量瓶中，加少量甲醇溶解后，加水至刻度，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液。 3. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 將對(duì)照品儲(chǔ)備液稀釋成每1µL含0.25、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mg黃芩甙的溶液，作為繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的系列濃度標(biāo)淮溶液。 4. 供試品溶液的制備 將供試品置100mL容量瓶中，加45％甲醇30mL超聲提取1h，用水定容至100mL，混勻，取適量置離心管中，15000r/min．離心5min，取上清液作為供試品溶液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密吸取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液20µL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)275nm處測(cè)定黃芩甙的吸收值，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對(duì)峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。 2.供試品的測(cè)定 精密吸取供試品液20µL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)275nm處測(cè)定黃芩甙的吸收值，用外標(biāo)法計(jì)算出其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
曹瑋,石躍玲. HPLC法測(cè)定黃連上清丸中黃芩甙的含量. 云南中醫(yī)中藥雜志，1999，19(6)：29-30. |
