黃楊寧片－環(huán)常綠黃楊堿D的測(cè)定－薄層色譜法

本方法采用薄層掃描法測(cè)定黃楊寧片中環(huán)常綠黃楊堿D的含量。

本方法適用于中成藥黃楊寧片。

供試品研成粉末，用氯仿水浴回流，過(guò)濾，濾液定容，制成供試液，點(diǎn)樣、展開(kāi)，以改良碘化鉍鉀顯色，用薄層掃描儀進(jìn)行掃描，于波長(zhǎng)λ_S=500nm，λ_R=700nm測(cè)量環(huán)常綠黃楊堿D吸收度積分值，計(jì)算其含量。

1. 氯仿

2.改良碘化鉍鉀

3. 濃氨試液

4. 苯

5. 丙酮

1 儀器

1.1 薄層掃描儀

1.2 涂布器

應(yīng)能使吸附劑在玻璃板上手工或自動(dòng)涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

1.3點(diǎn)樣器

一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點(diǎn)樣器材。

1.4展開(kāi)室

可用適合薄層板大小的專(zhuān)用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

2材料

2.1玻板

用10cm × 10cm、10cm × 15cm、20cm × 10cm或20cm × 20cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

2.2吸附劑

硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10－40µm。

1. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取環(huán)常綠黃楊堿對(duì)照品適量，加氯仿制成每1mL各含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

精密稱(chēng)取供試品粉末約1.5g，置氯仿20mL中水浴回流1小時(shí)，過(guò)濾，濾液稍加揮干，以氯仿定容至10mL，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱(chēng)取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

1.薄層板制備

將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布（厚度為0.25－0.5mm)取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺(tái)上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無(wú)麻點(diǎn)、無(wú)氣泡、無(wú)破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用，或用商品預(yù)制板。

2.點(diǎn)樣

精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各2µL，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況，以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。

3.展開(kāi)

將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開(kāi)缸的展開(kāi)劑中，以苯－丙酮（3：1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)至8－15cm時(shí)，取出薄層板，晾干，噴以改良碘化鉍鉀溶液顯色，取出，晾干。

4.含量測(cè)定

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周?chē)�用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，用雙波長(zhǎng)進(jìn)行掃描，波長(zhǎng)：λ_S =500nm，λ_R=700nm，測(cè)量供試品吸收度積分值與對(duì)照品吸收度積分值，計(jì)算。