導(dǎo)赤丸－鹽酸小檗堿的測(cè)定－薄層掃描熒光法

本方法采用薄層掃描法測(cè)定導(dǎo)赤丸中鹽酸小檗堿的含量。

本方法適用于中成藥導(dǎo)赤丸。

供試品本品加鹽酸-甲醇(1∶100)，浸泡過(guò)夜，超聲，濾過(guò)， 制成供試液，點(diǎn)樣、展開，用薄層掃描儀進(jìn)行熒光鋸齒掃描，激發(fā)波長(zhǎng)366nm測(cè)量鹽酸小檗堿吸收度積分值，計(jì)算其含量。

1.鹽酸

2.甲醇

3.苯

4.醋酸乙酯

5.異丙醇

6.濃氨溶液

1 儀器

1.1 薄層掃描儀

1.2點(diǎn)樣器

一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點(diǎn)樣器材。

1.3展開室

可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

1.4吸附劑

硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。

1.5 薄層板

硅膠G薄層板

2 試驗(yàn)條件

2.1展開劑：苯＋醋酸乙酯＋甲醇＋異丙醇＋水＝6＋3＋1.5＋1.5＋0.3)，置氨蒸氣飽和的層析缸內(nèi)展開。

2.2 掃描方式：熒光鋸齒掃描，激發(fā)波長(zhǎng)366nm。

1.對(duì)照品溶液的制備

取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含0.025 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.供試品溶液的制備

取本品1g，剪碎，精密稱定，置100mL量瓶中，加水5mL，放置使溶散，加入鹽酸-甲醇(1∶100)約80mL，60℃水浴中加熱15min，超聲處理15min，放至室溫加鹽酸-甲醇(1∶100)稀釋至刻度，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5mL，通過(guò)中性氧化鋁柱(100～200目，3g，0.9cm)，以乙醇25mL洗脫，洗脫液蒸干，用甲醇溶解并定容于5mL量瓶中，作為供試品溶液

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

精密吸取鹽酸小檗堿對(duì)照品對(duì)照品溶液(25.072mg/ul)1、2、3、4、5mL，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，按上述條件展開，晾干，掃描，測(cè)定峰面積，計(jì)算回歸方程Y=312.0236 2055.577X，r=0.9997；線性范圍為0.25072～0.22536μg。

2.供試品含量測(cè)定

精密吸取供試品溶液4μL，對(duì)照品溶液2μL與4μL，分別交叉點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑硅膠GF254薄層板上，按標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下方法展開，掃描測(cè)定，按外標(biāo)二點(diǎn)法計(jì)算鹽酸小檗堿含量。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

鄔國(guó)慶，周富榮，薄層掃描法測(cè)定導(dǎo)赤丸中鹽酸小檗堿的含量，中國(guó)中藥雜志，1999，24（7)：412～413