方法名稱: |
銀翹解毒湯-綠原酸含量測定-HPLC-UV |
應(yīng)用范圍: |
用于銀翹解毒湯中綠原酸的含量測定 |
方法原理: |
本品加開水(95 ℃)浸泡提取,經(jīng)液相色譜分離,在328 nm處測定峰面積,用外標(biāo)法計算含量 |
儀器設(shè)備及實驗條件: |
儀器 Agilent 1100 高效液相色譜儀(美國惠普公司);UV 檢測器 色譜條件 色譜柱:C18柱(4.6×200 mm,5 μm);流動相:乙腈-0.4 %磷酸溶液(13∶87);流速:1 mL/min;柱溫:室溫;檢測波長:328 nm |
試樣制備: |
對照品溶液的制備 取綠原酸對照品,加甲醇制成每1 mL含36.8 μg的溶液,即得。 供試品溶液的制備 稱取銀翹解毒湯超微飲片與其傳統(tǒng)飲片各50 g,超微飲片置夾層保溫杯中用開水(95 ℃)浸泡二次,第一次用8倍開水浸泡20 min,第二次用6倍開水浸泡15 min;傳統(tǒng)飲片按湯劑制備方法煎煮二次(加水量與煮沸時間同超微飲片),分別過濾,濾液合并,離心(1000 r/min,3 min),得樣品K與Y。將樣品K、Y分別定容至500 mL備用。分別吸取樣品液K、Y各10 mL,加甲醇超聲15 min,過濾,濾液以甲醇定容至100 mL,作為供試品溶液。 |
操作步驟: |
分別精密吸取綠原酸對照液以及銀翹解毒湯超微飲片與傳統(tǒng)飲片供試品溶液各10 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計算綠原酸含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
蔡光先,楊永華,陳燕軍等. 銀翹解毒湯超微飲片與傳統(tǒng)飲片的化學(xué)對比研究. 中國實驗方劑學(xué)雜志.2002,8(6):5~6 |