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表達禽流感病毒H5亞型HA蛋白的重組新城疫LaSota弱毒疫苗株

公開(公告)號 CN1298845C  
公開(公告)日 2007.02.07  
申請(專利)號 CN200510097996.3  
申請日期 2005.09.02  
專利名稱 表達禽流感病毒H5亞型HA蛋白的重組新城疫LaSota弱毒疫苗株  
主分類號 C12N7/01(2006.01)I  
分類號 C12N7/01(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;A61K39/12(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中國農(nóng)業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所  
發(fā)明(設(shè)計)人 步志高;陳化蘭  
地址 150001黑龍江省哈爾濱市市南崗區(qū)馬端街427號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 中科專利商標代理有限責任公司  
代理人 程金山  
國省代碼 黑龍江;23  
主權(quán)項 一種生產(chǎn)表達編碼野生型或突變型禽流感病毒H5亞型血凝素(HA)蛋白的基因的重組新城疫LaSota弱毒疫苗株的方法,該方法包括: (1)構(gòu)建轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒,其中所述轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒是pBRN-FL-H5wtHA或pBRN-FL-H5mutHA,其核苷酸序列分別如圖11和13所示; (2)構(gòu)建轉(zhuǎn)錄輔助質(zhì)粒,其中所述轉(zhuǎn)錄輔助質(zhì)粒包括如下三個質(zhì)粒:包括編碼所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的核蛋白(NP)的cDNA序列的質(zhì)粒、包括編碼所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的磷酸蛋白(P)的cDNA序列的質(zhì)粒、和包括編碼所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的大聚合酶蛋白(L)的cDNA序列的質(zhì)粒; (3)將所述轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒和轉(zhuǎn)錄輔助質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染所述病毒復制許可的宿主細胞,培養(yǎng)轉(zhuǎn)染后的宿主細胞; (4)收獲上清液,過濾后繼續(xù)敏感細胞傳代或接種雞胚尿囊腔救獲重組病毒株, 其中所述宿主細胞是穩(wěn)定表達T7聚合酶的細胞系。  
摘要 本發(fā)明涉及一種表達野生型或突變型禽流感病毒H5亞型血凝素(HA)蛋白的重組新城疫LaSota弱毒疫苗株,更具體地,重組新城疫LaSota弱毒疫苗株是rLasota-H5wtHA和rLasota-H5mutHA。本發(fā)明還公開了制備所述重組新城疫LaSota弱毒疫苗株的方法和該重組新城疫LaSota弱毒疫苗株在制備預防禽流感的疫苗中的應用。  
國際公布  
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