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降解合成制藥有機廢水的特效菌株及構(gòu)建方法

公開(公告)號 CN1594539A  
公開(公告)日 2005.03.16  
申請(專利)號 CN200410041125.5  
申請日期 2004.06.30  
專利名稱 降解合成制藥有機廢水的特效菌株及構(gòu)建方法  
主分類號 C12N1/00  
分類號 C12N1/00;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C02F3/34  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 南京大學  
發(fā)明(設(shè)計)人 程樹培;張徐祥;孫石磊;魏國哲;于洪峰;張力;朱程軍;萬玉秋;李維新;于紅霞;孫成;顧繼東  
地址 210008江蘇省南京市漢口路22號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 南京蘇高專利事務(wù)所  
代理人 成立珍  
國省代碼 江蘇;32  
主權(quán)項 降解制藥廢水特效菌株,其特征是以親株1白腐真菌(Phanerochaetechrysosporium),親株2土著細菌XZ1(Bacillus),親株3酵母(Saccharomycescerevisiae)真核細胞原生質(zhì)體和原核細胞原生質(zhì)體制備后融合。先制備原生質(zhì)體,并經(jīng)離心后收集、緩沖液清洗后獲得,然后進行二次融合。第一次融合:等量的親株1白腐真菌的原生質(zhì)體與親株2土著細菌XZ1細胞的原生質(zhì)體混合、并在聚乙二醇、CaCl2、蔗糖配制的誘導(dǎo)液中融合,經(jīng)離心后收集融合產(chǎn)物;第二次融合:上次得到的等量的菌落與親株3釀酒酵母細胞的原生質(zhì)體混合、在聚乙二醇、CaCl2、蔗糖配制的誘導(dǎo)液中融合,經(jīng)離心后收集融合產(chǎn)物、含蔗糖高滲緩沖液離心清洗后、分別涂布于SIM1鏈霉素Sm培養(yǎng)基、SIM2制霉菌素Nt培養(yǎng)基、SIM3鏈霉素Sm+制霉菌素Nt的雙抗培養(yǎng)基三種固體鑒別培養(yǎng)基上,同時能在三種培養(yǎng)基上長出的菌落為三親跨界融合的保存號為CGMCC.1087的菌落。  
摘要 降解制藥廢水特效菌株,其構(gòu)建方法是將白腐真菌(Phanerochaetechrysosporium)真核細胞、土著細菌XZ1原核細胞(Bacillus)、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)真核細胞,共三個親株菌的兩界細胞的原生質(zhì)體進行融合,三親基因在同一個細胞內(nèi)重組整合,構(gòu)建出基因工程特效菌。本發(fā)明由雙親跨界融合和三親跨界融合兩部分組成。特效菌株含有親株2的基因DNA片段,不同于親株2,也不同于親株1和親株3。特效菌株綜合了三親株優(yōu)勢,利于處理降解制藥廢水。原生質(zhì)體融合不產(chǎn)生新基因,不存在基因污染問題。  
國際公布  
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