PCR溫度循環(huán)至關(guān)重要,PCR擴(kuò)增儀各參數(shù)必須準(zhǔn)確。自Perkin –Elmer Cetus公司第一臺(tái)PCR擴(kuò)增儀問(wèn)世以來(lái),現(xiàn)已有幾十家不同的廠家在國(guó)內(nèi)外生產(chǎn)和銷售PCR擴(kuò)增儀。在短短的幾年間,擴(kuò)增儀經(jīng)過(guò)幾代的發(fā)展,不斷采用新技術(shù),并且進(jìn)一步朝方便、實(shí)用、高智能化和自動(dòng)化的方向發(fā)展。
為了便于了解和選購(gòu)適宜的PCR實(shí)驗(yàn)設(shè)備,現(xiàn)將部分國(guó)內(nèi)外PCR擴(kuò)增儀列表如下(表22-5);這些儀器主要用變溫鋁塊、變溫水浴及變溫氣流的方式達(dá)到熱循環(huán)的目的,各有其優(yōu)缺點(diǎn)。國(guó)產(chǎn)1109型DNA擴(kuò)增儀則是用恒溫浴機(jī)械手移位式。更接近于手工操作。PTC-51A/B體積小,智能化與自動(dòng)化程序高,可以兼做套式PCR,方便實(shí)用。以上各種儀器一般都配有微電腦自動(dòng)控制溫度、時(shí)間及循環(huán)數(shù),可以達(dá)到節(jié) 省勞動(dòng)力的目的。在采用這些儀器作PCR試驗(yàn)之前,一般均應(yīng)實(shí)測(cè)管內(nèi)溫度變化循環(huán)情況,以了解升、降溫時(shí)管內(nèi)因熱傳導(dǎo)造成的溫度滯后情況和實(shí)際到達(dá)的最高、最低溫度,用于修正設(shè)計(jì)的循環(huán)參數(shù)。溫度滯后受到所用Eppendorf管材料、壁厚及形狀(與鋁塊孔匹配程度)的影響,這對(duì)變溫鋁塊式儀器影響更大些。對(duì)于配用制冷機(jī)式半導(dǎo)體元件致冷的儀器,在使用低于室溫的溫度來(lái)保冷PCR反應(yīng)后小管時(shí),應(yīng)注意冷凝水的問(wèn)題,勿使流入儀器內(nèi)浸濕半導(dǎo)體元件而損壞儀器。
表22-5 國(guó)內(nèi)外生產(chǎn)的幾種DNA擴(kuò)增儀
儀器型號(hào) | 生產(chǎn)廠家 | 型式 | 特點(diǎn) | 管數(shù) | 報(bào)價(jià) |
1109型 | 北京新技術(shù)所與軍科院聯(lián)合 | 機(jī)械臂
變溫水浴 |
電子調(diào)溫 | 40×0.5ml | 16400元/臺(tái) |
90A/B型 | 中科院遺傳所 | 機(jī)械臂
變溫水浴 |
電熱 | 14000元/臺(tái) | |
PTC-51A/B型 | 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 | 變溫氣流 | 電子調(diào)兼作套式 | 30×0.5ml | 12000元/臺(tái) |
DNA Thermal Cycler | Perkin –ElmerCetus(美) | 變溫鋁塊 | 壓縮機(jī)致冷 | 48×0.5ml | US $ 20000.- |
Thermocycler
#60 。00 。180 |
B..Braun
Biotech (德) |
變溫水浴98℃四檔 | 電熱,自來(lái)水冷卻 | 60×1.5ml
100×1.5ml 180×1.5ml |
DM 30000.- |
Automatic temperature Cy-cler Single Block Twin Block | Ericomp Inc.(美) | 變溫鋁塊25~100℃ | 電熱,自來(lái)水冷卻 | 29×1.5ml
58×1.5ml |
US $4985.-
US $7980.- |
Grant Autogen | Grant Instrumant Ltd(美) | 變溫水浴0~99℃ | 電熱,自來(lái)水冷卻或加冷循環(huán)器 | 50×1.5ml
or 50×1.5ml
|
US $250. –plus
US $ 15.-for Rack(x2) |
Techne PHC-1
PHC-2 |
Techne Ltd.(英) | 變溫鋁塊0~99℃三檔 | 電熱500W水冷100W | 54×0.5ml
54×0.5ml 24×1.5ml |
£3383. –
£3997. - |
BioOven | BioThrm Corp(美) | 變溫氣流
-150℃ |
115V 11A | 200’s of 4×96plate | US $ 2990. - |
Trio-Thermo-block TB-1 | Biomertra(德) | 半導(dǎo)體變溫 | 220V | 3×20管
分別控溫 |
DM12900. - |
Micro cycler E | Eppendorf(美) | 變溫鋁塊 | 220V/100V | 3×29管 | US $ 3500. - |