乙型肝炎病毒HBsAg檢測假陽性原因分析
目前國內(nèi)臨床多采用ELISA 法檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物，它以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原抗體的特異性反應(yīng)與m.zxtf.net.cn酶對底物的高效催化作用相結(jié)合，通過洗滌除去多余游離反應(yīng)物，以保證實驗結(jié)果特異性和穩(wěn)定性，但其步驟多，影響因素多，各環(huán)節(jié)均需嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行。
假陽性可能導(dǎo)致因素：
1．內(nèi)源性因素 血清是最常見的E1 ISA標(biāo)本，大約有4O 的人血清標(biāo)本含類風(fēng)濕因子、補體、嗜異性抗體嗜靶抗原、自身抗體等非特異性物質(zhì)。它們的存在對El ISA測定有干擾作用易造成假陽性結(jié)果，應(yīng)該在不同時期多次采血以減少假陽性率。
2．外源性因素 1)標(biāo)本溶血：各種人為因素引起標(biāo)本溶血，使細(xì)胞內(nèi)過氧化物酶進(jìn)人血漿，并吸附于細(xì)胞及纖維蛋白原上，增加加樣后微孔板洗滌難度，引起HRP活性增高，造成非特異性顯色。阮樂幸口 發(fā)現(xiàn)溶血標(biāo)本OD值較高，且與溶血程度成正比；2)標(biāo)本受細(xì)菌污染產(chǎn)生非特異性顯色；3)標(biāo)本保存不當(dāng)；4)標(biāo)本凝集不全血清中殘留纖維蛋白原；5)比色時間：有研究 顯示雙波長法比色，延遲10 min或更長時間比色，結(jié)果有不同程度的“高檢出”現(xiàn)象，因此檢測應(yīng)保證終止顯色后及時比色；6)人為因素：試劑因素、加樣不準(zhǔn)確、孵育溫度及時間、洗板次數(shù)、顯色液的加入方式、標(biāo)本有污染和操作不熟練等。
王嫻默等報導(dǎo)6例假陽性標(biāo)本經(jīng)分析因標(biāo)本溶血導(dǎo)致假陽性標(biāo)本有2例，標(biāo)本離心不全有2例，標(biāo)本共血污染有2例。實驗結(jié)果提示要做好HBsAg檢測工作，提高檢測質(zhì)量，必須選擇國家衛(wèi)生部批檢合格試劑盒；標(biāo)本空腹采集無溶血，血清完全分離；操作嚴(yán)格按說明書操作規(guī)程進(jìn)行；臨床檢驗各室應(yīng)根據(jù)目的不同、項目不同分別采血，防止轉(zhuǎn)血過程中標(biāo)本污染可能，導(dǎo)致結(jié)果錯誤的發(fā)生；對于陽性標(biāo)本或可疑標(biāo)本采用不同廠家不同方法及重新采血復(fù)查。
以上筆者通過易造成病毒性肝炎檢測假陽性結(jié)果進(jìn)行分析，在實際工作中應(yīng)引以借鑒，做好標(biāo)本的接收、處理、檢測、報告及保存等工作，盡量減少其檢測干擾因素。而現(xiàn)階段由于方法學(xué)特定的局限性及試劑盒客觀存在的質(zhì)量差異，抗原抗體結(jié)合有一定線性區(qū)、等價區(qū)和抗原過剩區(qū)，只有當(dāng)HBsAg濃度在線形范圍內(nèi)，S／CO值與HBsAg濃度呈正相關(guān)，故臨床報告化驗單時，不宜單純報告陰、陽性，且建議臨床規(guī)范化驗單，臨床醫(yī)生在化驗單上詳細(xì)注明患者病情和分期。
