第九章 循環(huán)系統(tǒng)
第一節(jié) 急性犬失血性休克及其救治
【實驗?zāi)康?/b>】
(1)用放血的方法復(fù)制犬失血性休克模型。
(2)觀察失血前和失血性休克后血流動力學(xué)改變和微循環(huán)變化。
(3)探討失血性休克的發(fā)生機(jī)理，熟悉救治措施。
(4)觀察補充血容量和給血管活性藥物治療后血流動力學(xué)改變和微循環(huán)變化。
【實驗原理】
根據(jù)微循環(huán)學(xué)說,休克〈shock)可以定義為各種原因引起有效循環(huán)血量減少,微循環(huán)灌流障礙,引起重要生命器官血液灌注不足,從而導(dǎo)致細(xì)胞功能紊亂的全身性病理過程,也稱為休克綜合征(shock syndrome)。
休克的病因有許多種,本實驗采用頸動脈放血的方法,直接減少有效循環(huán)血量,復(fù)制低血容量性休克(hypovolemic shock)模型。由于放血一定程度后可使循環(huán)血量不足,靜脈回心血量減少,血壓下降,通過壓力感受器反射,引起交感神經(jīng)興奮,外周血管收縮, 組織灌流量急劇減少,導(dǎo)致失血性休克 (IMInorrhagic shock)。通過輸液,補充血容量,搶救休克,同時使用不同血管活性藥物,比較其療效,分析它們在失血性休克治療中的作用。
【實驗動物】
家犬，10-20kg，性別不拘。
【實驗藥品與器材】
3％戊巴比妥鈉、125單位/ml肝素生理鹽水、生理鹽水、微循環(huán)灌流液(臺氏液加1％明膠)、5％葡萄糖液、酚妥拉明，手術(shù)器械，10ml、20ml、50ml注射器，100ml燒杯、儲血瓶，輸尿管插管、動脈導(dǎo)管及壓力傳感器、靜脈導(dǎo)管及壓力傳感器、呼吸傳感器、微循環(huán)觀察裝置(灌流盒、連續(xù)變倍顯微鏡) ，生物信息采集處理儀，AVL血氣分析儀。
【實驗觀察指標(biāo)】
(1)血流動力學(xué)指標(biāo)：動脈血壓、脈壓差、心率、中心靜脈壓。
(2)微循環(huán)指標(biāo)：微血管內(nèi)血流速度、微血管直徑、毛細(xì)血管數(shù)/固定視野內(nèi)、白細(xì)胞附壁及嵌塞。
(3)尿量(滴或ml/min)。
(4)呼吸頻率與幅度。
(5)休克前和休克后血氣和酸堿指標(biāo)變化：動脈血pH、PaO2、PaCO2、AB、SB和BE。
【實驗方法與步驟】
(1)成年家犬一只，稱重后，靜脈注射3％戊巴比妥鈉1ml/kg 全身麻醉。
(2)將麻醉犬仰臥固定于犬實驗臺，頸前部和腹股溝部備皮。作長6～8cm的頸部正中切口，分離出氣管，在甲狀軟骨下2～3cm處作倒“T” 形切口，插入Y型氣管插管并固定，Y型管一側(cè)與呼吸傳感器相www.med126.com連，信號傳入生物信息采集處理儀記錄呼吸變化。
(3)分離左頸總動脈，插入動脈導(dǎo)管，壓力信號經(jīng)壓力傳感器傳入生物信號采集處理儀，記錄動脈血壓和脈壓差。分離右頸外靜脈，插入靜脈導(dǎo)管(插入導(dǎo)管長度約15cm左右，相當(dāng)于上腔靜脈入右心房口處) ，壓力信號經(jīng)壓力傳感器傳入生物信號采集處理儀，記錄中心靜脈壓。
(4)在左側(cè)腹股溝部觸及股動脈搏動后，沿動脈走行方向作約4cm長切口，分離出左股動脈和靜脈，分別作股動脈和股靜脈插管，兩插管經(jīng)三通與儲血瓶和輸液瓶相連通，以備放血和輸液。插管操作完畢先從輸液瓶向股靜脈緩慢輸入生理鹽水(5～10滴/分) ，保持靜脈暢通。
(5)在恥骨聯(lián)合上作下腹部正中切口(切口長約5cm) ，找到膀胱，排空尿液后，將膀胱從腹腔拉出，在背面膀胱三角區(qū)找到雙側(cè)輸尿管入口，分離雙側(cè)輸尿管并插入輸尿管插管，記錄每分鐘尿滴數(shù)。
(6)在右側(cè)腹直肌旁作約6cm長切口，鈍性分離肌層，打開腹腔后，輕輕拉出一段游離度較大的小腸腸袢，放置在微循環(huán)恒溫灌流盒內(nèi)，使腸系膜置于灌流盒載物臺上，用顯微鏡觀察腸系膜微循環(huán)。
(7)放血前記錄觀察指標(biāo)：觀察記錄血流動力學(xué)指標(biāo)、微循環(huán)指標(biāo)、尿量、呼吸、血氣和酸堿指標(biāo)。
(8)放血復(fù)制失血性休克；
①記錄各項指標(biāo)后，將與股動脈插管相連的三通向儲血瓶開放，降低儲血瓶高度并松開動脈夾，快速放血，在15分鐘內(nèi)使平均動脈壓降至40mmHg。調(diào)節(jié)儲血瓶高度以長期維持血壓在40mmHg。為防止血液凝固，儲血瓶內(nèi)應(yīng)在股動脈插管前加入肝素生理鹽水5mg。
②根據(jù)實驗時間決定維持40mmHg血壓時間的長短，維持時間不應(yīng)少于30分鐘，在此段時間內(nèi)應(yīng)觀察記錄好各項指標(biāo)的變化。
(9)失血性休克救治：
①用動脈夾夾閉股動脈近心端停止放血，三通開關(guān)向輸液瓶開放。將儲血瓶內(nèi)的血液倒入瓶口有雙層過濾紗布的輸液瓶內(nèi)，快速從股靜脈輸回血液及與失血量等量的生理鹽水(250滴/分)。
②輸血輸液后，觀察記錄各項指標(biāo)以及微循環(huán)恢復(fù)狀況。
③用酚妥拉明10mg加入100ml 5％葡萄糖溶液中靜脈滴注，100滴/分。輸注完畢后，觀察記錄各項指標(biāo)以及微循環(huán)變化。
【注意事項】
(1)盡量減少手術(shù)性出血，勿使用手術(shù)刀和剪刀分離血管和肌層。
(2)牽拉腸袢要輕，以免損傷腸系膜影響微循環(huán)觀察或引起低血壓。
(3)壓力傳感器內(nèi)應(yīng)事先充盈肝素生理鹽水并排盡氣泡，安置高度應(yīng)與心房水平一致。
(4)觀察微循環(huán)時，應(yīng)始終固定視野，先選好標(biāo)志血管，分清動脈、靜脈和毛細(xì)血管，畫出觀察視野圖并標(biāo)明動脈、靜脈和毛細(xì)血管。
【思考題】
(1)如果不給失血性休克家犬輸回原血，或者臨床上救治失血性休克病人又暫時得不到血液，你將如何進(jìn)行救治？請設(shè)計救治方案。
(2)為防止缺血缺氧對組織細(xì)胞損害，還可選擇哪些藥物？
(3)本實驗中是否存在缺血-再灌注損傷？
(金海燕)
第二節(jié) 藥物的量效關(guān)系與競爭性拮抗
【實驗?zāi)康?/b>】
（1)觀察應(yīng)用酚妥拉明前后，不同劑量新福林對離體兔主動脈的收縮作用，加深對激動劑、拮抗劑、量效關(guān)系和競爭性拮抗的理解。
（2)了解離體血管實驗方法。
【實驗原理】
在一定范圍內(nèi)藥物隨劑量或濃度的增加，藥理效應(yīng)也相應(yīng)增加。以效應(yīng)為縱坐標(biāo)，劑量或濃度的對數(shù)值為橫坐標(biāo)，可繪制出對稱的“S”型曲線。競爭性拮抗藥與激動藥并用時，能與激動藥互相競爭與相同的受體結(jié)合，降低激動藥與受體的親和力，而不影響其內(nèi)在活性，故可使激動藥的量效曲線平行右移。
本實驗選擇對α1受體有興奮作用的新福林，應(yīng)用家兔的胸主動脈血管環(huán)為標(biāo)本（含α1受體)進(jìn)行實驗，按累積濃度進(jìn)行實驗，觀察應(yīng)用酚妥拉明前后，隨著新福林劑量的增加，血管環(huán)收縮效應(yīng)的變化，從而繪制量效曲線。
【實驗對象】
家兔1只，1.8～2.5kg，雌雄不拘。
【實驗藥品與器材】
1.藥品
酚妥拉明：10-5 M，新福林：10-8 M、10-7 M、10-6 M、10-5 M、10-4 M、10-3 M、10-2 M、。
2.器材
生物信號采集處理儀、張力傳感器、離體血管浴槽裝置一套、超級恒溫水浴器、氧氣鋼瓶、手術(shù)器械一套，培養(yǎng)皿、燒杯、1毫升注射器、萬能支架、克氏液、砝碼等，
【實驗觀察指標(biāo)】
用藥前后血管環(huán)張力變化。
【實驗方法與步驟】
（1)準(zhǔn)備好灌流系統(tǒng)，調(diào)節(jié)浴槽水溫于37.4 ℃，調(diào)節(jié)恒溫浴槽中克氏液為20 ml，標(biāo)記好液面高度，連接并調(diào)好張力傳感器和生物信號采集處理儀。
（2)取家兔一只，于耳緣靜脈注射空氣處死。迅速打開胸腔，摘除心肺，找到并取出整段胸主動脈(約6 cm)，放入盛有預(yù)先冰冷的充氧克氏液的培養(yǎng)皿中。用克氏液將淤血沖洗干凈，仔細(xì)剝離血管壁結(jié)締組織，然后將血管剪成寬約4 mm的血管環(huán)。用兩個不銹鋼的鉤將血管環(huán)置于浴槽內(nèi)，一端固定于浴槽底部，另一端與傳感器相連(圖9-3)，控制通氧速度為每秒1～2個氣泡。
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圖9-3 離體血管描記裝置
（3)血管環(huán)取靜息張力5 g平衡約45 min后，走一段基線，從10-8 M濃度開始，依次加入濃度按對數(shù)值等距遞增的新福林溶液0.2 ml（稀釋100倍)，至收縮達(dá)最大值（增加劑量不再使收縮加強)為止。換入新鮮克氏液沖洗3～4次，重新平衡約20分鐘，使血管張力恢復(fù)到基線位置。預(yù)先加入酚妥拉明10-5 M（終濃度)0.2 ml。然后重復(fù)上述給藥步聚，觀察收縮幅度的變化。
（4)實驗完畢，打印記錄結(jié)果，測量每次加新福林后收縮曲線高度，換算為收縮力，以g表示。
將結(jié)果填入表9-1中。
表9-1不同濃度新福林引起血管環(huán)收縮幅度(g)
| 10-8 | 10-7 | 10-6 | 中國衛(wèi)生人才網(wǎng) 10-5 | 10-4 | 10-3 | 10-2 | |
| 用酚妥拉明前 用酚妥拉明后 |
（5)以血管環(huán)收縮幅度為縱坐標(biāo)，藥物對數(shù)濃度為橫坐標(biāo)，將應(yīng)用酚妥拉明前后新福林引起血管環(huán)收縮的兩條量效曲線繪入同一坐標(biāo)紙上。
【實驗注意事項】
（1)制備血管環(huán)時，不要用鑷子用力夾，不要過分牽拉，以免損傷血管內(nèi)皮。
（2)浴槽內(nèi)的的溫度控制必須在37.0土2℃，氧氣供給量不宜過大。
（3)平衡要好，整個操作期間不能有振動，否則需重新平衡15 min以上。
（4)本實驗屬于定量觀察，每次所加液量、藥量必須準(zhǔn)確。
【思考題】
（1)什么是激動劑？什么是拮抗劑？
（2)何謂競爭性拮抗？其量效關(guān)系曲線將如何改變？
（庹勤慧 黃紅林)
