方法名稱： |
桂林西瓜霜噴霧劑—鹽酸小檗堿的測定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測定桂林西瓜霜噴霧劑中鹽酸小檗堿的含量。 本方法適用于中成藥桂林西瓜霜噴霧劑。 |
方法原理： |
供試品置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇后，超聲提取，濾過,續(xù)濾液用乙醇稀釋后用流動相制成供試品溶液，吸取20μL進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長345nm處檢測鹽酸小檗堿的吸收值，計算出其含量 |
試劑： |
1.乙腈（色譜純) 2.甲醇（色譜純) 3.磷酸二氫鈉 |
儀器設(shè)備： |
1儀器 1.1高效液相色譜儀 1.2色譜柱 Inertsil-ODS-3（5μm，250mm×4.6mm) 1.3紫外吸收檢測器 2色譜條件 2.1流動相：甲醇 乙腈 0.05mol/L磷酸二氫鈉 = 20 30 50 2.2檢測波長：345nm |
試樣制備： |
1.稱取供試品 精密稱取供試品內(nèi)容物4g。 2.對照品溶液的制備 精密稱取經(jīng)105℃干燥至恒重的鹽酸小檗堿對照品適量，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋到刻度，搖勻，精密量取5mL,置50mL量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻，即得每1mL含鹽酸小檗堿40.76μg的對照品溶液。 3.標準溶液的制備 精密吸取對照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL置于10mL量瓶，分別用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為繪制標準曲線的系列標準溶液。 4.供試品溶液的制備 將上述供試品置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，稱定重量，超聲處理30min，時時振搖，放冷；再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，放置，濾過。精密量取續(xù)濾液5mL,置入50mL量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻；精密量取2mL置10mL量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，作為供試品溶液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1.標準曲線的繪制 精密吸取5.3項下的標準曲線測定溶液20μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長345nm處測定鹽酸小檗堿的吸收值，以鹽酸小檗堿峰面積為縱坐標，對照品溶液濃度為橫坐標，繪制標準曲線。 2.供試品的測定 取供試品溶液20μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長345nm處測定鹽酸小檗堿的吸收值，計算出其含量。 |
參考文獻： |
金陽. HPLC法測定桂林西瓜霜噴霧劑中鹽酸小檗堿的含量.現(xiàn)代中藥研究與實踐，2004,18(2):34-35 |
