新清寧片—大黃素的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定新清寧片中大黃素的含量。

本方法適用于由熟大黃等幾味中藥制成的新清寧片。

供試品粉末置磨口錐形瓶中，精密加入無水乙醇，塞緊，稱定重量，置水浴上加熱回流1h，放冷，用乙醇補足減失的重量，濾過，精密量取續(xù)濾液，置燒瓶中，水浴蒸干，加30%乙醇-鹽酸（10:1)溶液，置水浴中加熱水解1h，立即冷卻，用氯仿強力振搖提取4次，合并氯仿液，置水浴上蒸干，殘渣用無水乙醇-醋酸乙酯（2:1)溶解，移置量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm)過濾，精密吸取續(xù)濾液10μL，注入高效液相色譜儀，用紫外檢測器檢測大黃素的吸收值，計算出其含量。

1. 甲醇（色譜純)

2. 無水乙醇、醋酸乙酯（分析純)

3. 大黃素（購自中國藥品生物制品檢定所)

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Nucleosil ODS C₁₈柱（250mm×4.6mm，5μm)。

1.3 紫外檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 水=85 15（含0.1%的磷酸)

2.2 柱溫：室溫

2.3 檢測波長：254 nm

2.4 流速：1.0mL/min

1. 稱取供試品

取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細（過65目篩)，精密稱取藥粉0.5g。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取大黃素對照品適量，用無水乙醇-醋酸乙酯（2:1)溶解制成濃度為0.05mg/ml，作為對照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

供試品粉末置磨口錐形瓶中，精密加入無水乙醇25ml，塞緊，稱定重量，置水浴上加熱回流1h，放冷，用乙醇補足減失的重量，濾過，精密量取續(xù)濾液10ml，置燒瓶中，水浴蒸干，加30%乙醇-鹽酸（10:1)溶液15ml，置水浴中加熱水解1h，立即冷卻，用氯仿強力振搖提取4次，每次15ml，合并氯仿液，置水浴上蒸干，殘渣用無水乙醇-醋酸乙酯（2:1)溶解，移置25ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm)過濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

1.標準曲線的繪制

分別精密吸取上述對照液2 、4 、6 、8、10μl進樣，用紫外檢測器測定大黃素的吸收度值，以標準溶液濃度對峰面積繪制標準曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測定

精密吸取上述供試品溶液10μL注入高效液相色譜儀，用紫外檢測器測定大黃素的吸收度值，計算出其含量。

苗明三，李振國 主編. 現(xiàn)代實用中藥質量控制技術. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2000，83-84.