方法名稱： |
左金丸－羥基吳茱萸堿的測定－薄層熒光掃描法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用薄層熒光掃描法測定左金丸中羥基吳茱萸堿的含量。 本方法適用于中成藥生物制劑加味左金丸。 |
方法原理： |
供試品于量瓶中經(jīng)氯仿溶解并定容，制成供試液，點(diǎn)樣、展開，以濃鹽酸衍生化，用薄層掃描儀進(jìn)行掃描，于波長λS=365nm，λR=400nm，狹縫0.1mm×7mm,測量羥基吳茱萸堿（hydroxyevodiamine)的吸收度積分值，計(jì)算其含量。 |
試劑： |
1. 石油醚 2. 甲醇 3. 氯仿 4. 環(huán)己烷 5. 硫酸 6. 乙醇 7. 濃鹽酸 |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 薄層掃描儀 1.2 展開缸 可用適合薄層板大小的專用色譜缸12cm×4cm×10cm。 1.3 離心機(jī) 2材料 2.1微量毛細(xì)管 |
試樣制備： |
1. 對照品溶液的制備 精密稱取標(biāo)準(zhǔn)品羥基吳茱萸堿約1～2mg，分別置于2ml量瓶中，用氯仿溶解并定容至刻度。分別吸取各溶液25 ,50 ,75 ,100 和125μl ,置于1 ml 量瓶中,用氯仿定容至刻度,混勻,作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 供試品溶液的制備 精密稱取供試品粉末10mg，加15 %Na2CO3溶液2滴潤濕,再加氯仿1 ml ,超聲提取3 次,每次15min ,4 000 r·min - 1離心5 min ,合并氯仿提取液,濃縮至干,以氯仿溶解,轉(zhuǎn)移至1 ml 量瓶中,定容,作為供試品溶液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 分別吸取以上標(biāo)準(zhǔn)品溶液25，50，75，100和125μl，置于1ml 量瓶中，用氯仿定容至刻度，混勻，5種濃度的溶液各吸取1μl，點(diǎn)于同一塊薄層板上，展開，衍生化，測定。以點(diǎn)樣量(ng) 為橫坐標(biāo)，斑點(diǎn)峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。 2. 供試品的測定 |
參考文獻(xiàn)： |
劉蘊(yùn)秀, 羅淑榮, 馮孝章。薄層熒光掃描法測定吳茱萸藥材及其制劑中5 種生物堿的含量，藥學(xué)學(xué)報(bào)， 1999 ,34(5)∶383～386. |
