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一種混合床凝膠過(guò)濾層析技術(shù)用于病毒性疫苗純化的方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1977970A  
公開(kāi)(公告)日 2007.06.13  
申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) CN200610048874.X  
申請(qǐng)日期 2006.12.06  
專(zhuān)利名稱(chēng) 一種混合床凝膠過(guò)濾層析技術(shù)用于病毒性疫苗純化的方法  
主分類(lèi)號(hào) A61K39/12(2006.01)I  
分類(lèi)號(hào) A61K39/12(2006.01)I;C12N7/02(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 云南沃森生物技術(shù)有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 黃 鎮(zhèn);向左云  
地址 650106云南省昆明市高新區(qū)云南省大學(xué)科技園2期A3幢4樓  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) 昆明正原專(zhuān)利代理有限責(zé)任公司  
代理人 劉明哲  
國(guó)省代碼 云南;53  
主權(quán)項(xiàng) 一種混合床凝膠過(guò)濾層析技術(shù)用于病毒性疫苗純化的方法,其步驟是: (1)采用組織培養(yǎng)技術(shù)或重組DNA技術(shù)收獲病毒抗原; (2)取Sepharose 4FF和Sepharose 6FF凝膠,Sepharose 4FF凝膠與Sepharose 6FF凝膠混合的體積比為0.05∶1~20∶1,充分混勻后裝填于柱中; (3)用0.1~0.5mol/L NaOH,以線(xiàn)流速10-100cm/h去除內(nèi)毒素,維持時(shí)間2-10小時(shí); (4)用含0.02~0.50mol/L氯化鈉氯化鉀的平衡緩沖液平衡柱子; (5)對(duì)需要純化病毒抗原,用截留分子量10~300kD的超濾膜進(jìn)行超濾濃縮; (6)將濃縮后溶液上樣于充分平衡的Sepharose 4 FF-Sepharose 6FF混合床柱,上樣量為1~15%柱體積,洗脫液與平衡緩沖液相同; (7)分部收集,進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)測(cè)定。  
摘要 本發(fā)明一種混合床凝膠過(guò)濾層析技術(shù)用于病毒性疫苗純化的方法,屬于生物技術(shù)領(lǐng)域,其步驟為,將Sepharose 4FF凝膠與Sepharose 6 FF凝膠充分混勻后裝填于柱中,將超濾濃縮后的病毒抗原上樣于混合床柱進(jìn)行凝膠過(guò)濾層析,獲得純化的病毒抗原。本發(fā)明提供了一種純化效果好、抗原回收率高的病毒抗原純化新方法,純化的病毒抗原適合于制備疫苗。  
國(guó)際公布  
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