荷丹片－荷葉堿的測定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定荷丹片中荷葉堿的含量。

本方法適用于中成藥荷丹片。

本品加三氯甲烷加熱回流，提取液蒸干，殘渣加甲醇溶解，濾過，取續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長270nm處檢測荷葉堿的吸收值，計算出其含量。

1. 三氯甲烷

2 .乙腈

3 .三乙胺

4 .冰醋酸

5 .濃氨試液

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按荷葉堿計算應(yīng)不低于2000。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：乙腈 三乙胺 冰醋酸 水＝27 1.8 0.78 70.6

2.2檢測波長：270nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品10片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取約0.4g，精密稱定，為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取荷葉堿對照品適量，加乙醇制成每1mL含16mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品10片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取約0.4g，精密稱定，用濃氨試液5mL濕潤，加三氯甲烷60mL，加熱回流3小時，放冷，移至分液漏斗中，分取三氯甲烷層，余留物再用三氯甲烷25mL分3次振搖提取，合并三氯甲烷液，回收三氯甲烷至干，殘渣用乙醇溶解，轉(zhuǎn)移至10mL量瓶中，加乙醇至刻度，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長270nm處測定荷葉堿（C₁₉H₂₁NO₃)的峰面積，計算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p554。