水蛭

1.抗凝血和抗栓作用：水蛭水提物0.45g/kg灌胃后4小時(shí)及連續(xù)灌胃7天，對ADP誘導(dǎo)的大鼠血小板聚集均有顯著的抑制作用，其抑制率隨藥物濃度的增高而提高，且能降低全血比粘度和血漿比粘度，縮短紅細(xì)胞電泳時(shí)間；體外法試驗(yàn)，水蛭水提物200mg/ml、100mg/ml及50mg/ml對健康人血小板聚集也有顯著的抑制作用。水蛭的醇提取物抑制血液凝固的作用，強(qiáng)于虻蟲、蟄蟲、桃仁等；醇制劑作用強(qiáng)于水制劑。
1.1.抗凝血作用：水蛭素（Hirudin，Hemophilin)不受熱或乙醇之破壞，是凝血酶抑制劑，每毫克水蛭素含10、400抗凝血酶單位的活性。20mg水蛭素可阻止100g人血之凝固。
1.1.1.研究結(jié)果表明，水蛭素是迄今為止，世界上最強(qiáng)的凝血酶特效抑制劑。它與凝血酶結(jié)合，形成一種非共價(jià)復(fù)合物。這種復(fù)合物極其穩(wěn)定，解離常數(shù)為10-12數(shù)量級(jí)。且反應(yīng)速度極快。由于水蛭素與凝血酶的親和力極強(qiáng)，在很低的濃度下，就能中和凝血酶。1μg水蛭素可以中和5μg凝血酶，相應(yīng)于摩爾數(shù)比為1：1。水蛭素的抗凝活性是用標(biāo)準(zhǔn)凝血酶來測定的。www.med126.com能夠中和一個(gè)國際單位（NIH單位)凝血酶的水蛭素的量，為一個(gè)抗凝單位（lAT-μ)的水蛭素。
1.1.2.水蛭素不僅能阻止纖維蛋白原凝固，也能阻止凝血酶催化的進(jìn)一步的血瘀反應(yīng)。如凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ的活化及凝血酶誘導(dǎo)的血小板反應(yīng)等，均能被水蛭素抑制。其抑制率取決于水蛭素的濃度，血液凝固被推延或完全被阻止。
1.1.3.水蛭素不但抗凝血，而且對由凝血酶誘導(dǎo)的其它細(xì)胞的非瘀血現(xiàn)象也有作用。例如能夠抑制凝血酶誘導(dǎo)的成纖維細(xì)胞的增殖和凝血酶對內(nèi)皮細(xì)胞的刺激。
1.1.4.水蛭素也能抑制凝血酶對血小板的作用，抑制凝血酶同血小板的結(jié)合，抑制血小板受凝血酶刺激的釋放，并能使凝血酶與血小板解離。Josenh A Jakubowski等按照水蛭素C-端殘基（53-64)模式，合成12肽的水蛭素片斷，其抗凝作用強(qiáng)于水蛭素，部分凝血酶時(shí)間（APTT)、凝血酶原時(shí)間（PT)和凝血酶時(shí)間（TT)都延長了。該片斷在抑制由凝血酶誘發(fā)的血小板活性方面，主要是阻止血小板聚集，抑制5-羥色胺釋放和TXA2的形成。Jean Marc Schlaeppi等制備了水蛭素的單克隆抗體，來研究水蛭素與凝血酶的作用，發(fā)現(xiàn)這些抗體與水蛭素的結(jié)合位置，都緊靠C-端殘基。
1.1.5.吻蛭素與水蛭素不同。水蛭素的作用是使凝血酶失活而抑制血液凝固，而吻蛭素從非藥用水蛭中分離到的成分的作用是直接對血纖維蛋白酶原和血纖維蛋白的溶解作用。沒有發(fā)現(xiàn)Haementeria ghilianii螞蟥唾液腺抽提物中含有凝血酶失活劑和人血纖維蛋白溶酶原激活劑。試驗(yàn)也證明Ca（2＋)不是吻蛭素抗凝作用驅(qū)動(dòng)者。由于吻蛭素在人和豬的血漿和人的純血纖維蛋白溶酶原中有抗凝作用，這個(gè)發(fā)現(xiàn)具有一定的價(jià)值。首先，象水蛭素一樣，它可作為研究血液凝固機(jī)制的一種工具。其次，吻蛭素對存在于血漿中的蛋白質(zhì)水解酶抑制劑不敏感，這是已知的獨(dú)一無二的血纖維蛋白水解酶。它在溶解凝血酶制劑方面具有理想的特性在臨床上用于溶解血凝塊，治療血凝塊引起的一些疾病如血栓等具有潛在的價(jià)值。
1.2.抗栓作用：
1.2.1.水蛭素對細(xì)菌內(nèi)毒素引起的大鼠栓形成有預(yù)防作用，并能減少大鼠的死亡率。
1.2.2.李凡等對水蛭素的溶栓作用進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，結(jié)果表明：對實(shí)驗(yàn)性血栓形成有明顯的抑制血栓形成作用（Teruhiko法)；對溶解溶血酶所致實(shí)驗(yàn)性靜脈血栓有溶栓作用。
1.2.3.松田秀秋等以水蛭等藥材的70%乙醇提取物為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行了體內(nèi)和體外試驗(yàn)，結(jié)果表明：水蛭等藥材與用于較初期瘀血的丹皮、桂皮、芍藥（抗血栓形成作用)的作用完全不同，其作用不是預(yù)防血栓形成，而是溶栓作用。
1.2.4.水蛭素對各種血栓病都有效，尤其是對靜脈血栓和彌漫性血管內(nèi)凝血（DIC)。給予適當(dāng)量的水蛭素，可抑制大鼠和兔頸動(dòng)脈血栓的形成，形成的血栓比對照組小。血管壁損傷引起的頸動(dòng)脈血栓和冠狀動(dòng)脈的血栓形成，可以被水蛭素完全抑制。它能有效地抑制大鼠和斷奶的小豬的微血栓形成，減輕由凝血酶或內(nèi)毒素在凝血系統(tǒng)誘導(dǎo)的改變，減少纖維蛋白沉積。
1.2.5.對于不同實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ�，抗栓的有效劑量和血濃度也不一樣。用大鼠做�?shí)驗(yàn)，比較水蛭素治療各種血栓的有效濃度，靜脈血栓和彌漫性血管內(nèi)凝血（DIC)所需的水蛭素血漿濃度最低，且均比肝素低。www.med126.com水蛭素治療靜脈血栓所需的血濃度是肝素的1/20，而治療DIC僅是肝素的1/50。因?yàn)樵陟o脈血栓形成過程中，主要的血漿凝固因子被活化，導(dǎo)致凝血酶的形成，而水蛭素是最強(qiáng)的凝血酶抑制劑。治療動(dòng)脈血栓則要求較高的血漿濃度。B. Kaiser和F. Markwardt在大鼠實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，按40AT-μ/kg.Min的速度，由靜脈滴入水蛭素，血漿濃度達(dá)到4.3 AT-μ/ml，則完全抑制靜脈血栓的形成。而要完全抑制動(dòng)脈血栓的形成，則需要按照200 AT-μ/kg.min給藥60分鐘。抑制動(dòng)脈血栓比抑制靜脈血栓，水蛭素的劑量要高出5倍。與肝素相比，水蛭素抑制血栓形成的濃度，遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于其引起出血的濃度。在它完全抑制動(dòng)脈血栓的血濃度下，只引起出血時(shí)間延長50-60%，而肝素則有引起出血的嚴(yán)重副作用。
1.2.6.在抗栓治療中，與肝素相比，水蛭素的另一個(gè)顯著優(yōu)點(diǎn)，是不增加抗凝血酶-Ⅲ（AT-Ⅲ)的消耗，肝素與水蛭素都能抑制凝血酶對纖維蛋白原與血小板的作用，但水蛭素與輔因子無關(guān)。在DIC發(fā)病過程中，AT-Ⅲ要減少，這將減少了肝素治療DIC的療效，當(dāng)AT-gd在血漿中的濃度低于正常值70-80%，則有形成血栓的危險(xiǎn)。
2.降低血脂作用：取健康家兔32只，體重2.0-2.5kg，性別不拘。給予標(biāo)準(zhǔn)飼料，分籠飼養(yǎng)，全部家兔隨機(jī)分為3組，即造型級(jí)（n＝9)，預(yù)防組（n=8)，治療組（n=11)，每日每只兔加喂膽固醇0.8g。（4只死于腹瀉)預(yù)防組在造型開始同時(shí)，每日每只兔投水蛭（自然風(fēng)干)粉1g，治療組于造型結(jié)束后投藥，方法同上。造型組除服用膽固醇0.8g/天，不予其它藥物，造型后繼續(xù)服用6周，用以對照。造型前后及治療后，從股外靜脈取血，分別測定血清總膽固醇（TC)、甘油三酯（TG)、6-酮PGF1α、TXB2各1次；經(jīng)治療6周后，全部家兔用耳緣靜脈氣栓法處死，立即進(jìn)行剖檢，從主動(dòng)脈起始部到髂總動(dòng)脈取出整條主動(dòng)脈，剝離外膜，縱行切開后平鋪于福爾馬林中固定，蘇丹Ⅲ染色，采用九宮格法分別計(jì)算每條主動(dòng)脈的動(dòng)脈粥樣硬化（AS)斑塊面積占主動(dòng)脈或冠狀動(dòng)脈總面積的百分?jǐn)?shù)，然后石蠟切片，HE染色鏡檢。結(jié)果如下：預(yù)防效果：水蛭對TC、TG的升高有較好的抑制作用；給服水蛭后，6-酮-PGF1α值上升，而TXB2下降，兩值維持在正常限內(nèi)。高脂血癥家兔造型組和水蛭組AS病理變化差別非常顯著（P<0.01)。治療效果：給水蛭粉治療后，TC、TG下降非常顯著；6-酮-PGF1α明顯上升，而TXB2明顯下降。造型組與治療組AS病理變化差異性非常顯著（P<0.01)。
3.對實(shí)驗(yàn)性腦血腫及皮下血腫的影響：取水蛭干品，水煮l小時(shí)，再經(jīng)乙醇逐步沉淀，回收乙醇，過濾，最后以蒸餾水稀釋至1g/ml備用。腦血腫實(shí)驗(yàn)用家兔20只，體重2.0-2.5kg，對照組及給藥組各10只。將家兔俯臥固定，在顱頂人字縫處，沿中線向前0.5cm、向右0.3cm處，垂直進(jìn)針1.4cm。另從耳動(dòng)脈取血0.5ml，注入腦內(nèi)，可在中腦部形成腦實(shí)質(zhì)血腫。給藥組每月耳靜脈注入水蛭注射液2g/kg，對照組則給生理鹽水1ml/kg。連續(xù)7天，處死動(dòng)物后，分別測定腦血腫、炎細(xì)胞浸潤及腦組織變性壞死面積[mm（2)]，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。耳血腫實(shí)驗(yàn)取兔左耳動(dòng)脈取血1ml，立即注入右耳尖向下3cm處的背側(cè)，形成皮下血腫。分組觀察及給藥劑量同上。結(jié)果如下：給藥組腦切片最大血腫面積（M±SD)為3.2±3.79mm（2)，對照組為6.7±5.19mm（2)，較對照組小，有促進(jìn)腦血腫吸收趨勢（t=1.72，0.05腦出血的血腫吸收，減輕腦組織周圍炎癥反應(yīng)及水腫，緩解顱內(nèi)壓升高，改善局部循環(huán)，有利于神經(jīng)功能的恢復(fù)；對兔耳局部的實(shí)驗(yàn)性血腫也有促進(jìn)吸收作用。
4.對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物終止妊娠的作用：取螞蟥（Whitmaniapigra)的干燥全體，水煎2次，過濾，取濾液濃縮成40%的浸膏（即100ml水煎劑中含螞磺40g)置冰箱內(nèi)保存。以昆明雜系小鼠進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果表明：螞磺對小鼠各個(gè)時(shí)期妊娠，包括著床和妊娠早、中、晚期都有終止妊娠的作用；終止妊娠的百分率是隨著劑量的增加而增加的。不同途徑給藥，皮下注射、腹腔注射、肌肉注射和灌胃均有抗早孕效果。水蛭2.5-3.0g/kg皮下注射時(shí)，對小鼠具有完全的抗早孕作用，而同時(shí)皮下注射外源性黃體酮則可對抗水蛭的抗早孕作用，水蛭組與水蛭加黃體酮組比較P<0.001。水蛭對蛻膜瘤有抑制作用，而這一作用又能被黃體酮所對抗。
5.對心血系統(tǒng)的作用：
5.1.水蛭素還能對抗凝血酶所致的離體蛙心收縮力增強(qiáng)作用。
5.2.通過放射性同位素86銣來觀察對小鼠有增加攝取作用，說明有增加心肌營養(yǎng)性血流量。對抗垂體后葉素在家兔引起的心電圖改變以0.5ml/kg即可防止垂體后葉素引起的第一期及第二期心電圖改變，此點(diǎn)抗垂體后葉素保護(hù)作用與臨床相吻合。心血管功能的特征變化一左心室壓升高程度也減少了。
5.3.水蛭還可分泌一種組織胺樣物質(zhì)，因而可擴(kuò)張毛細(xì)血管而增加出血。