二、中醫(yī)證型動(dòng)物模型復(fù)制方法及動(dòng)物選擇
中醫(yī)證型的動(dòng)物模型大約有“陽虛”、“陰虛”、“脾虛”、“脈微欲絕”、“血虛”、“血瘀”、“肝郁”、“寒證”、“熱證”、“溫病”及“里實(shí)”等11種。其造型的思路和方法除個(gè)別者外，均是選擇一些造成與臨床證型相仿的致病因素，作用于動(dòng)物機(jī)體使其產(chǎn)生類似臨床某些證的模型，而致病因素不外乎物理、化學(xué)、生物以及某些內(nèi)臟損傷或切除等。如①用生大黃、番瀉葉、玄明粉造成脾虛運(yùn)化失常模型；②用阿托品（膽堿能M型受體阻斷劑)、利血平（耗竭兒茶酚胺類遞質(zhì))造成植物神經(jīng)功能失調(diào)擬脾虛、陽虛、陰虛模型；③根據(jù)中醫(yī)饑飽無度、損傷脾胃的理論，用甘蘭加豬脂使飲食失節(jié)造成脾虛生化乏源模型；④以大劑量醋酸氫化可的松使動(dòng)物產(chǎn)生一系列耗竭現(xiàn)象，達(dá)到虛損狀態(tài)比擬陽虛模型；⑤以適量的大腸桿菌靜脈注射，復(fù)制急性和暴發(fā)性大腸桿菌敗血癥比擬溫病模型；⑥依中醫(yī)“正邪相爭”理論為指導(dǎo)，用給動(dòng)物注入強(qiáng)毒細(xì)菌以“助邪”及結(jié)扎血管阻斷血運(yùn)降低機(jī)體抗病力以“傷正”的辦法，造成動(dòng)物“里實(shí)”模型；另外，還開展了采用多種病因造型方法的嘗試，其造型所用動(dòng)物主要還是小動(dòng)物（大、小白鼠)，也有用金黃地鼠、家兔和貓的。給藥（或作用)途徑除胃飼外，是肌肉、皮下、腹腔及耳緣靜脈注射。
中醫(yī)證型動(dòng)物模型造型方法。
1．“衛(wèi)氣營血”模型（熊啟達(dá)等：四川醫(yī)學(xué)雜志，（2)：65，1982)：選用家兔，體重2.1～2.75kg。用強(qiáng)毒力的大腸桿菌以0.75ml（每ml含大腸桿菌27億個(gè))/kg體重，注射至兔耳緣靜脈造型。感染后動(dòng)物表現(xiàn)蜷縮、懶動(dòng)、少食、體溫升高、心率增快、耳血管周圍滲血、出血；舌象有明顯病理改變；血培養(yǎng)有大腸桿菌生長，白細(xì)胞及血小板顯著減少�？�100%造型成功，適用于開展實(shí)驗(yàn)性溫病研究。
2．“寒證、熱證”模型（梁月華等：在醫(yī)雜志，（11)，1982．)：選用雌性大白鼠，體重170～210g。熱證型：用溫?zé)崴帲?a class="channel_keylink" href="/pharm/2009/20090113060019_95414.shtml" target="_blank">附子、干姜、肉桂、黨參、黃芪、白術(shù))制成100%水煎劑灌胃，每次2ml，每日2次。寒證型：首先于腹腔內(nèi)注射三聯(lián)疫苗1ml，每日1次共2次；然后給予寒冷藥（膽草、黃連、黃柏、銀花、連翹、石膏)制成的100%水煎劑灌胃，每次2ml，日2次。給藥后15天60-70%造型成功。熱證型：心率加快，飲水量增多，尿內(nèi)兒茶酚胺及17-羧皮質(zhì)類固醇排出量增多。寒證型：心率減慢，尿內(nèi)兒茶酚胺及17-羧皮質(zhì)類固醇排出量減少。用此模型可測(cè)量痛閾和驚厥閾值及腦內(nèi)介質(zhì)；觀察動(dòng)情周期及血內(nèi)孕酮含量。
3．“血瘀”模型：高粘滯血癥模型（阮景綽等)：選用家兔，耳緣靜脈注入10%葡聚糖生理鹽水，每公斤體重注入5ml，可100%造型成功。給藥后可見微循環(huán)血液變慢，紅細(xì)胞聚集，全血及血漿粘度增加，血沉快，紅細(xì)胞電泳變慢。此模型適用于“活血化瘀”藥物作用原理的研究。
“血瘀”模型（毛騰敏：北醫(yī)學(xué)報(bào)，（4)：305，1981。)：選用大白鼠，皮下注射0.1%腎上腺素0.2ml/次，日2次，加冰水刺激5分鐘處置1日或2日，給藥后次日，血粘度明顯升高，血中纖維蛋白及紅細(xì)胞壓積亦升高。用此法連續(xù)處置2天，隔48小時(shí)處死，心肌出現(xiàn)散在性壞死灶。心肌病變能模擬克山病心肌壞死，此模型已用于大劑量維生素C治療克山病機(jī)制的研究。
“血瘀”模型（金惠銘等：中華醫(yī)學(xué)雜志，（1)：50，1982.)；選用家兔，耳緣靜脈快速注射10%高分子右旋糖酐（HMWD)生理鹽水溶液，劑量為1.5g/kg。注藥后30分鐘即可從微循環(huán)活體觀察到血流明顯減慢，血細(xì)胞嚴(yán)重聚集、微血管周圍明顯滲出和出血管微循環(huán)障礙表現(xiàn)。12～24小時(shí)后微循環(huán)障礙達(dá)高峰。此模型主要用于研究微循環(huán)障礙、中醫(yī)血瘀及探討活血化瘀藥物作用原理。
第二軍醫(yī)大學(xué)亦用此法制造“”血瘀模型，選用未孕家兔，雌雄不構(gòu)，體重2～2.5kg，10%HMWD靜脈注射，每次15ml/kg，每周2次，歷時(shí)10周。
4．“血虛”模型（賁長恩等：中醫(yī)雜志（6)：69，1981.)：選用雄性大白鼠，體重180-250g。于實(shí)驗(yàn)第1、4、7天皮下注射2%乙�；诫拢ˋcety-Pheny hydrazine,APH)生理鹽水溶液，以每100g體重計(jì)，第1次1ml，第2、3次0.5mll給藥后可形成實(shí)驗(yàn)性溶血性貧血。紅細(xì)胞與血紅蛋白減少，出現(xiàn)大量海氏（Heine)小體�？删S持9～14天。此模型適用于血虛與氣虛藥物的研究。
5．“脾虛”模型（李傳英等：淅江中醫(yī)雜志（8)：355，1982)：選用雄性大白鼠。以大黃、玄明粉、玄明粉水煎劑和大黃、番瀉葉的水浸泡液灌胃給藥。給藥后動(dòng)物發(fā)生泄瀉、清瘦、食量下降、精神萎磨不振，毛發(fā)欠光澤，基本符合臨床脾虛病人癥狀。
另外還有報(bào)導(dǎo)選用昆明種雄性小鼠，體重18～20g；25日齡Wistar大鼠，體重70～100克；敘利亞金黃地鼠。用大黃水浸煎劑，小鼠0.5g/ml/日/只，金黃地鼠每日100g體重0.7～1.25g/ml，大鼠用15%大黃粉懸液3～5ml。胃飼法給藥，每日1次，大鼠每日二次，給藥后第8天90%以上造型成功。
6．“肝郁”模型（陳國林)：選用大、小白鼠。小白鼠腹腔注射艾葉注射液0.6ml（含生藥0.3g)，每日1次，分別于45天及60天處死。大白鼠腹腔注射艾葉注射液2ml(含生藥2.0g)每日1次，半月后改為隔日1次，40天處死。艾葉中毒后動(dòng)物易激怒，好斗，咬人，進(jìn)食量少，體重增加慢。小白鼠：肝臟有灶性壞死，以60天組較45天組為重。大白鼠：肝細(xì)胞腫脹，胞漿疏松出現(xiàn)顆粒，門區(qū)有嗜酸細(xì)胞浸潤，中央靜脈充血。
7．“陽虛”模型：選雄性小白鼠，體重25～30g。以大劑量醋酸氫化可的松肌肉注射1mg/保，每日1次，約7次，約7次造型成功，適于研究補(bǔ)腎藥的作用。也可選用20～28g小鼠，急性組織分別用利血平5、10、20、50、100、200μg/只；亞急性組，給500μg/kg（隔天下午)；均腹腔給藥。亞急性組另加更生霉素74μg/kg，共7次，亦腹腔給藥，均可100%造型成功，適于“形寒肢冷”證發(fā)病機(jī)理研究和探討中藥（理中湯)作用機(jī)理研究。還可給小鼠每日灌喂甲基氧嘧啶2.5mg/只或5-10mg/日，一周左右即可有95%造型成功，適用于觀察受體與甲狀腺素減少之間關(guān)系。
8．“陰虛”模型：選用雄性小鼠，體重20-30g，甲狀腺素片3mg/只/月，利血平0.02mg/只/日共研成粉末，以生理鹽水稀釋，充分搖勻后灌胃給藥。8～10天造型成功，適用于研究滋陰中藥作用原理。
9．“陰證”與“陽證”模型（董筠一等：陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，（3)：1，1981)：選用雄性小白鼠，體重20～30g。利血平10μg（溶于0.1ml鹽水)/只/日肌注，4～5天后出現(xiàn)類似陰證癥候；阿托品15～20μg/只/日肌注，，2天后出現(xiàn)類似陰證癥候。適于觀察機(jī)體各器官系統(tǒng)的機(jī)能改變，細(xì)胞水平的電生理變化以及中藥或針刺對(duì)上述變化的改善情況。
10．“脈微欲絕”模型（左箴等：第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)（1)：19，1982)：選用貓，經(jīng)股靜脈注入3%戊巴比妥鈉溶液，按0.25～0.5ml/kg劑量造型。注藥后心肌收縮力極度減弱，近于停跳狀態(tài)，血壓降至10mmHg左右，動(dòng)物股動(dòng)脈搏動(dòng)微弱，幾乎不能觸及，可100%造型成功，適于觀察強(qiáng)心升壓藥物，如附子制劑及其分離物的急性效應(yīng)。醫(yī).學(xué) 全在.線提供www.med126.com
11．“氣虛”模型（上海第二醫(yī)學(xué)院：上海中醫(yī)藥雜志（5)：8，1964)：選用家兔，體重1.07～2.5kg，通過人工慢性貧血造型。每日由耳動(dòng)脈、耳靜脈或心臟放血10ml左右。動(dòng)物可出現(xiàn)精神萎頓、嗜睡、四肢蜷縮，肌張力減低、體溫較正常稍高。血細(xì)胞壓積下降，總蛋白略有減低，舌質(zhì)蒼白、胖嫩、濕潤。適用于“氣虛”舌象研究。
12．“陰陽失調(diào)”模型（楊連卿等：中西藥結(jié)合雜志（6)：353，1983)：選用雄性Wistar大鼠，體重235～297g。以外源性糖皮質(zhì)激素地塞米松混懸液7.5μg/100g體重灌胃，每日下午時(shí)藻胃，共7次（7天實(shí)驗(yàn))；另組同法灌胃28次，中途休息2天（30天實(shí)驗(yàn))。經(jīng)電鏡觀察，腎上腺皮囊狀帶細(xì)胞線粒體退行性變性變化明顯，血漿皮質(zhì)酮水平低下，示動(dòng)物HPA（下丘腦一垂體-腎上腺皮質(zhì))軸功能受抑。
13．“里實(shí)”模型（孫愛真等)：選用狗，以中醫(yī)“邪正相爭”理論為指導(dǎo)�！爸啊�，選擇毒性極強(qiáng)的細(xì)菌，經(jīng)多次復(fù)種，增強(qiáng)致病毒力后，注入闌尾肌層；“傷正”：結(jié)扎闌尾根部，并阻斷血循環(huán)以大大削弱機(jī)體抗病能力。術(shù)后二天內(nèi)拒食、神萎、倦伏不動(dòng)；大體標(biāo)本見闌尾粗大，漿膜面血管擴(kuò)張、充血、有膿性、纖維素性滲出物，腸管增厚水腫、粘膜見散在壞死及潰瘍形成，腔內(nèi)積有濃性滲出物，鏡檢：闌尾腔內(nèi)積有成片膿性滲出物，粘膜壞死、脫落，有肉芽組織增生，各層有不同程度充血、水腫等，WBC、MPT急劇升高。適于研究中醫(yī)通里攻下治則作用原理以及大承氣湯等復(fù)方的藥理作用。
